text:
DUNG DỊCH
1) β-mercaptoethanol 1M (1000X)
2) Acid ascorbic 100X (5000µg/ml)
Lọc vô trùng, bảo quản lạnh 40C và sử dụng trong vòng 1 tháng sau khi pha.
3) Ammonium acetate 10 M (CH3COONH4):
Lọc vô trùng bằng phin lọc 0.22 µm, trữ ở 4oC hoặc nhiệt độ phòng.
Chú ý: Không hấp vô trùng vì CH3COONH4 bị phân hủy ở nhiệt độ cao.
4) Amphotericin B 0,1%
Lọc vô trùng, bảo quản lạnh -200C
5) Ampicillin:
Chuẩn bị dung dịch Stock nồng độ 100 mg/ml trong nước cất. Nồng độ cuối cùng sử dụng là 100 µg/ml.
Lọc vô trùng bằng phin lọc, trữ ở -20oC. Tránh đông lạnh nhiều lần.
6) Bicarbonate 7,5%
Bổ sung: 100 µl Pen-Strep 200X, 20 µl Ampotericin B.
7) Biotinylated goat anti- avidin (0.5 mg/ml):
Aliquot 100 µl, trữ ở -20oC.
8) Blocking reagent:
Đặt hỗn hợp trong water bath 70oC cho đến khi tan hoàn toàn. Trữ ở -20oC.
9) Bloodlysis buffer 20X: (NH4Cl 3.1 M; KHCO3 0.2 M; EDTA 20 mM; pH 7.4)
Hấp khử trùng, trữ ở nhiệt độ phòng, sử dụng trong một năm.
10) Dung dịch BSS = 9 SolA + 1 SolB
Sol A :
Sol B
11) COLAGENASE 0.075%
Lọc vô bằng màng loc 0.22 µm. Bảo quản ở -4oC.
12) Cresol Red Loading Dye 2.5X (phản ứng PCR):
(Chứa 1M Sucrose, 0.02% cresol).
Chuẩn bị dung dịch Cresol Red 1% (0.5 g/50 ml): 0.5 g Cresol Red trong 50 ml nước cất hai lần.
13) Dung dịch bảo quản màng ối
Hấp khử trùng ở 1210C, 1 atm trong 30 phút.
14) Dung dịch cố định Carnoy
15) Dung dịch cố định mẫu (Formaldehyde 4% đệm phosphate)
16) Dung dịch cố định mô paraformandehyde 4% PBS:
Khấy đều và chỉnh pH bằng 1-2 giọt NaOH 1N để làm tan hết bột paraformandehyde. Tiếp tục khuấy và chỉnh pH 7.3 Để dung dịch nguội ở nhiệt độ phòng. Dùng ngay.
17) Dung dịch đệm acid citric 0,1M
18) Dung dịch đệm citrate/acetate 0,1M (pH = 6)
19) Dung dịch đệm Sodium acetate 0,1 M
20) Dung dịch FSH stock 100X
21) Dung dịch lấy mẫu
22) Dung dịch li giải hồng cầu (pH =7,4)
Khử trùng bằng màng lọc 0,2 µm. Bảo quản ở 40C, sử dụng tối đa trong 3 tuần.
23) Dung dịch li giải tinh trùng (A) (pH =7.4)
Lọc vô trùng. Bảo quản trong tối ở 40C.
24) Dung dịch nạp mẫu DNA (Gel loading buffer)- cách 1
25) Gel loading buffer 6X - cách 2
26) Dung dịch nhược trương (0.04 M KCl, 0.025M Na citrate)
Bảo quản ở nhiệt độ phòng, sử dụng trong 1 tháng.
27) Dung dịch phá tế bào (Triton X-100 0,4%)
Lọc vô trùng, bảo quản lạnh 40C
28) Dung dịch protein chuẩn
29) Dung dịch rửa Rinse Buffer 1X
30) Dung dịch WB (glycerol đã chưng cất 10%, nước đã chưng cất 10%, v/v):
Hấp khử trùng, trữ ở 40C.
31) Dung dịch xử lý DEPC (diethylpyrocarbonate): 0.05- 0.1% (v/v)
Để quan đêm và hấp khử trùng. Trữ ở nhiệt độ phòng.
32) Denhardt’s 50X:
Lọc khử trùng.
33) Dispase II 0.5%
Lọc qua màng lọc vô trùng có 0,2 µm. Bảo quản ở 40C
34) DNase (10U/ml)
Lọc vô trùng, bảo quản lạnh -200C
35) EDTA Stock:
1 lít EDTA 0.5 M pH 8.0
Chỉnh pH về 8.0 bằng dung dich NaOH 1N.
36) Formaldehyde/PBS (Formaldehyde không acid trong PBS 1X 4%):
Thêm 27 ml Formaldehyde không acid vào 223 ml PBS 1X
37) Formamide 50%/Dextranesulphate 12.5%/SSC 2X:
Lắc đều hỗn hợp 3 giờ trong water bath 70oC. Aliquot 1 ml, trữ ở 4oC.
38) Formamide (de- ionized):
Khuấy ít nhất 2 giờ. Lọc 2 lần bằng giấy lọc Whatman. Aliquote 1 ml, trữ ở -20oC.
39) Formamide/dextran sulphate- buffer:
a. 50% formamide/ 20% dextran sulphate:
Ủ hỗn hợp ở 70oC trong 3 giờ. Aliquot 1 ml, bảo quản ở -20oC.
b. 50% formamide/ 10% dextran sulphate- buffer:
Trộn hoàn toàn, trữ ở 4oC.
40) Formamide/SSC/NaPi- buffer (Formamide denaturation buffer):
a. 70% Formamide/SSC/NaPi- buffer (70%/SSC 2X/NaPi 50 mM)
b. 60% Formamide/SSC/NaPi- buffer (60%/ SSC 2X/NaPi 50 mM):
c. 50% Formamide/SSC/NaPi- buffer (50%/ SSC 2X/NaPi 50 mM):
d. 30% Formamide/SSC/NaPi- buffer (30%/ SSC 2X/NaPi 50 mM):
41) HBSS (Hank’s Buffered Salt Solution)
Lọc vô trùng. Bảo quản ở nhiệt độ phòng.
42) HEPES 1M (C8H18N2O4S : N-2-Hydroxyethylpiperazine-N’-2 ethane sulfonic acid)
43) HEPES- BUFFERED SALINE:
Lọc vô trùng bằng phin lọc 0.2 µm, bảo quản ở 4oC, sử dụng trong 1 năm.
44) IPTG (Isopropylthio- β- D- galactoside):
Dung dịch IPTG 20% (0.8M)
Lọc vô trùng bằng phin lọc 0.2 µm. Aliquote 1 ml, trữ ở -20oC.
45) Glucose 2M Stock:
Lọc vô trùng.
46) Kháng sinh
Lọc qua màng lọc vô trùng có 0,2 µm. Bảo quản ở 40C
47) L-Glutamine 200 mM
Lọc vô trùng, bảo quản lạnh -200C
48) M9- buffer: (KH2PO4, NaCl, MgSO4)
49) Mg2+ 2M Stock:
Hấp hoặc lọc vô trùng.
50) MTT 5 mg/ml
Bảo quản trong tối ở 40C.
51) Na- acetate 3M, pH 5.6:
Trữ ở 4oC.
52) NaAc:
a. NaAc 3M, pH 4.8:
Hấp khử trùng.
b. NaAc 3M, pH 5.6:
Hấp khử trùng.
c. NaAc 3M, pH 6:
Hấp khử trùng.
d. NaAc 4M:
Hòa tan 54.4 g trong 100 ml nước.
Hấp khử trùng.
53) NaCl 5M:
Hấp khử trùng.
54) NaHCO3 7,5%
Hấp khử trùng ở 1210C, 1 atm trong 30 phút.
55) NaOH 5M:
Chú ý : Phản ứng tỏa nhiệt.
56) NaPi- buffer (sodiumphosphate) 0.5 M, pH 7.0
a. Na2HPO4 0.5M:
Hấp khử trùng.
b. NaH2PO4 0.5 M:
Hấp khử trùng.
c. NaPi- buffer (sodiumphosphate) 0.5 M pH7:
Aliquot 1 ml và ủ ở -20oC.
d. NaPi- buffer (sodiumphosphate) 0.5 M pH7.2 :
Chú ý : Sử dụng ngay sau khi pha, không lưu trữ.
57) NaPi HYB: Na2HPO4 0.125 M (pH 7.2); NaCl 0.25 M, EDTA 1 mM, SDS 7%, PEG- 6000 10%.
Sử dụng trong 6 tháng.
58) Neutralizing- buffer pH 7.0
59) NH4Cl 10X
Hấp khử trùng trong 30 phút. Bảo quản lạnh ở 40C.
60) Nicotinamide 10M (100X)
Pha nước ở nhiệt độ khoảng 450C để hòa tan hết nicotinamide.
61) PBS--
pH 7.4
62) PBS (+)
63) D-PBS (Môi trường thu nhận trứng)
64) Pepsin 10%
Aliquot 100 µl, trữ ở -20oC.
65) Percoll
Bảo quản ở 40C.
66) Phosphate buffer 0.5M, pH 7.0 = Sol 1(77ml) + Sol 2(33 ml)
67) PMSF 1M:
Nồng độ cuối sử dụng là 0.1 M. Trữ ở -200C
68) SB 20X (dung dịch điện di):
Khuyến cáo: Hòa tan 8 g NaOH vào nước, sau đó cân 40 g Boric acid hòa tan vào dung dịch, tiếp tục thêm acid Boric cho đến khi pH đạt 8.0.
Thêm nước cất 2 lần cho đủ 1 lít.
69) SDS Stock (Sodium lauryl sulfate) 20% (w/v)
Khuấy đều và đun dung dịch ở 680C cho đến khi hóa chất tan hoàn toàn. Chỉnh về pH 7,2. Không được hấp khử trùng, trữ ở nhiệt độ phòng.
70) SDS 0,5%
71) SE- buffer 10X (NaCl 0.75 M, EDTA 0.25 M, pH 8.0)
Điều chỉnh pH 8.0
72) Sodium Acetate 3M (CH3COONa) pH 5.2:
Điều chỉnh pH về 5.2 với acid acetic lạnh. Hấp khử trùng
73) SSC- buffer 20X (NaCl 3M, Natri citrate 0.3M):
Điều chỉnh pH 7.0, hấp khử trùng, trữ ở nhiệt độ phòng,sử dụng trong 1 năm.
74) TAE 50X:
75) TALP – Hepes
76) TALP – Hepes free Ca2+
77) TBE 5X
pH của Stock TBE 5X nên ở 8.3, lọc vô trùng với phin lọc 0.2 µm.
78) TE buffer:
Hấp khử trùng trong 20 phút, trữ dung dịch ở nhiệt độ phòng.
79) Testosterone Stock 10.000X
Bảo quản lạnh ở 40C.
80) TN (Tris- HCl 1M, NaCl 1.5 M, pH 7.5)
81) TNB- buffer (Tris- HCl 0.1M, NaCl 0.15M, BMP 0.5%)
Aliquote 10 ml, trữ ở -20oC.
82) TNT (Tris- HCl 0.1M, NaCl 0.15M, Tween- 20 0.05%):
83) Tris- Cl 1M:
Hòa tan 121 g Tris Base trong 800 ml nước. Điều chỉnh pH:
a- pH 7.4 : 70 ml HCl
b- pH 7.6 : 60 ml HCl
c- pH 8.0 : 42 ml HCl
Thêm nước cất 2 lần để được thể tích cuối cùng là 1 lít. Hấp khử trùng.
84) Trypsin/EDTA 0,25 %
Khử trùng qua màng lọc 0,2 µm. Bảo quản ở 40C, sử dụng tối đa trong 3 tuần.
85) X- gal 2% (w/v) Stock (5- bromo- 4- chloro- 3- indolyl- β- D- galactoside):
Trữ ở -20oC, tránh ánh sáng.
HÓA CHẤT SINH HỌC PHÂN TỬ
MÔI TRƯỜNG NUÔI VI KHUẨN
1) Hóa chất dùng cho nhuộm bạc gel polyacrylamide
Dung dịch fixing 1 :
Dung dịch fixing 2 :
Nathiosulfat 0,02 %
AgNO3 0,2%
Dung dịch phát hiện
Dung dịch ngừng phản ứng
2) Hóa chất dùng cho điện di SDS- PAGE
- Tạo gel phân tích (recolving gel) 12.5%:
- Tạo gel tập trung:
- Dung dịch nạp và xử lý mẫu:
- Dung dịch điện di:
- Dung dịch nhuộm:
- Dung dịch tẩy nhuộm:
3) Hóa chất dùng cho kỹ thuật Southern blotting:
- Dung dịch Depurination: dung dịch HCl 250 mM
- Dung dịch Denaturation:
+ Dung dịch NaCl 1.5 M
+ Dung dịch NaOH 0.5 M
- Dung dịch Neutralization:
+ Dung dịch NaCl 1.5 M
+ Dung dịch Tris- HCl 0.5 M, pH 7.5
4) Hóa chất cho phản ứng MAC- ELISA:
- Chất ngưng phản ứng H2SO4 1N.
- Cơ chất TMB (3, 3’, 5, 5’- tetramethylbenzidine pha với H2O2 theo tỷ lệ 1 : 1.
- Dung dịch đệm carbonate dùng để pha với kháng thể IgM người:
- Dung dịch PBS 1X.
- Dung dịch Tween 20.
5) Hóa chất dùng trong kĩ thuật ELISA
6) Hóa chất dùng cho phản ứng tái gấp cuộn
7) Hóa chất tinh chế protein
8) Hóa chất cho tách chiết DNA bộ gene:
- Dung dịch TE
- Dung dịch I : sarkosyl (1%, w/v), NaCl 0.5M, SDS (1%, w/v)
- Dung dịch PCI : phenol:chloroform:isoamylalcohol theo tỉ lệ 25:24:1
- Dung dịch Sodium acetate 3M (pH 5,2)
- Ethanol 70%
9) Hóa chất dùng trong tách chiết DNA plasmid bằng phương pháp SDS-kiềm
Dung dịch I : 50 mM glucose, 25 mM Tris-HCl (pH 8), 10 mM EDTA (pH 8); hấp khử trùng 1210C trong 15 phút, giữ trong tủ mát.
Dung dịch II (chỉ pha trước khi sử dụng) : 0,2N NaOH; 1% (w/v) SDS; NaOH 0,2N
Dung dịch III : 5M potassium acetate; 60 ml glacial acetic acid, 28,5ml dH2O (pH 4,8); giữ trong tủ mát, làm lạnh trước khi sử dụng.
- RNase 1mg/ml; giữ trong tủ -200C.
- Phenol bão hòa trong TE (pH 8) và chloroform giữ trong tủ mát.
- Ethanol tuyệt đối và ethanol 70% (giữ ở -200C)
- Dung dịch TE : 100mM Tris-HCl (pH 8), 10 mM EDTA (pH 8)
- Sodium acetate 3M (pH 5,2)
10) Hóa chất Tách chiết bộ gen vi khuẩn Gram dương
- Dung dịch BLB (Bacillus Lysis Buffer) : NaCl 100 mM, EDTA (pH 7.5) 50mM
- Lysozyme 20 mg/ml (bảo quản ở -200C)
- N-lauroyl sarcosine 20%
- Phenol bão hòa trong TE (pH 8)
- Chloroform
- NaOAc 3M pH 5,2
- Ethanol 99% và 70% lạnh (giữ ở -200C)
- Dung dịch TE : Tris-HCl (pH 8) 10 mM, EDTA (pH 8) 1 mM
11) Hóa chất Tách chiết DNA bộ gen nấm men
- Lysis buffer : Tris-HCl (pH 7,5) 50 mM, β-mercaptoethanol 0,5%, EDTA (pH 8) 10 mM, lyticase 25u, RNase 1mg/ml
- SDS 10%
- Proteinase K 10mg/ml (giữ ở -200C)
- Phenol bão hòa trong TE (pH 8)
- Chloroform
- NaOAc 3M
- Ethanol 99% và 70% lạnh (giữ ở -200C)
- Dung dịch TE : Tris-HCl (pH 8) 10 mM, EDTA (pH 8) 1 mM
12) Hóa chất dùng cho việc thu nhận thể vùi E.coli
- Dung dịch phá màng tế bào :
- Dung dịch rửa thể vùi : dung dịch phá màng tế bào có bổ sung 0,5M urea.
- Dung dịch hòa tan protein ở dạng thể vùi (dung dịch A)
- Dung dịch sulfonate hóa protein
- Dung dịch CaCl2 100 mM, hỗn hợp dung dịch MgCl2 20mM và CaCl2 80mM vô trùng (giữ ở 40C)
- Dung dịch glycerol 80% vô trùng
- dH2O vô trùng.
- Tinh chế sản phẩm PCR và sản phẩm cắt
- Chloroform
- NaOAc 3M pH 5,2
- Ethanol 99% và 70% lạnh (giữ ở -200C)
- Binding buffer, Wash solution
- MilliQ
14) Môi trường dinh dưỡng NA (Nutrient Agar) – nuôi vi khuẩn
15) Hóa chất dung cho việc tinh sạch 10xHis MPI ở dạng biến tính
- Dung dịch gắn:
- Dung dịch rửa:
- Dung dịch dung ly protein:
a. Transfer buffer I 1X: (Tris 25 mM, Glycine 192 mM, pH 8.3)
Không điều chỉnh pH.
b. Transfer buffer II 1X: (Tris 25 mM, Glycine 192 mM, pH 8.3, 20% methanol)
Không điều chỉnh pH.
c. Western Buffer 10X : (Tris 200 mM, pH 7.5)
18) Hóa chất dùng cho xác nhận sự biểu hiện protein bằng phương pháp Western Blot
a. Dung dịch Towbin (chuyển màng):
b. Dung dịch PBST (Phosphate Buffer Saline Tween) dùng để pha loãng và rửa (pH 7,5)
c. Dung dịch khóa màng (membrane blocking)
d. Dung dịch kháng thể sơ cấp đặc hiệu cho protein mục tiêu và kháng thể thứ cấp có đánh dấu HRP – antibody (Horseradish Peroxidase antibody):
e. Dung dịch phát hiện phim HyperfilmTM ECL của Amersham Biosciences
pH = 7
20) Môi trường nhân sinh khối (A2)
pH = 4,5.
21) MÔI TRƯỜNG LB
Chỉnh pH 7.0 , bảo quản trong tủ -20oC. Khi dung đem hấp khử trùng 121oC trong 30 phút.
Lọc qua màng lọc vô trùng 0,2 µm. Bảo quản ở -200C
2) Môi trường EMEM
3) Hóa chất xử lí và bảo quản mẫu mô xương
Bảo quản ở 4oC, sử dụng trong 1 tuần.
* Môi trường biệt hóa mỡ:
Môi trường DMEM/F12, 10% FBS, 1% antibiotic- antimycotic bổ sung thêm:
Bảo quản ở 4oC, sử dụng trong 1 tuần.
* Môi trường biệt hóa mỡ:
Môi trường DMEM/F12, 10% FBS, 1% antibiotic- antimycotic bổ sung thêm:
a. Môi trường L- DMEM:
Bảo quản ở 4oC, sử dụng trong 1 tháng.
b. Môi trường H- DMEM:
Bảo quản ở 4oC, sử dụng trong 1 tháng.
46) Môi trường nuôi bạch cầu
Lọc vô trùng bằng phin lọc 0.2 µm. Bảo quản ở 4oC trong tối.
49) Môi trường nuôi chọn lọc tế bào gốc ung thư vú
24) Môi trường biệt hóa tế bào tiết Insulin:
Môi trường L-DMEM ,bổ sung :
- 10% FBS
- 10 mmol/l Nicotinamide
- 1 mmol/l β-mercaptoethanol
- 20 ng/ml EGF
Môi trường L-DMEM, bổ sung:
- 10% FBS
- 10 nmol/l exendine-4
- Môi trường H-DMEM, bổ sung
- 10% FBS
- 10-6 mol/l acid retinoic
Môi trường H-DMEM, bổ sung 10% FBS
a. BO- A:
b. BO- B:
c. Môi trường BO:
63) Môi trường tạo sphere
Hỗ trợ sinh sản
28) Dung dịch phá cumulus (Hyaluronidase 1,0 mg/ml)
29) Dung dịch pha loãng tinh trùng
27) Môi trường chất bảo quản đông lạnh
Dung dịch CPA1 (0,7M DMSO + 0.9 EG)
Lọc vô trùng. Bảo quản ở 40C.
Dung dịch CPA2 (1,4M DMSO + 1,8 EG)
Lọc vô trùng. Bảo quản ở 40C.
Dung dịch CPA3 (2,1M DMSO + 2,7 EG + 0,1M D-Glucose)
Lọc vô trùng. Bảo quản ở 40C.
- Môi trường giải đông chính là môi trường đông lạnh nhưng thứ tự đảo ngược thứ tự là CPA-3, CPA-2, CPA-1 và cuối cùng là môi trường TCM-199 bổ sung 20%FCS (môi trường dùng trong IVM)
28) Môi trường CR1aa (dùng nuôi phôi sau khi thụ tinh).
a. CR1aa- A:
b. CR1aa- B:
c. Môi trường CR1aa:
40) Môi trường IVF
Chuẩn pH 7.4, lọc vô trùng bằng màng lọc 0.2 µm, bảo quản trong tối ở 4oC
43) Môi trường L-DMEM bổ sung dịch chiết tụy
- L-DMEM (D5523, Sigma)
- 10% FBS (10082-139, Gibco)
- Dịch chiết mô tụy
- Bảo quản ở 40C, sử dụng trong 1 tháng.
58) Môi trường nuôi tế bào gốc trung mô máu cuống rốn
Bảo quản ở 4oC, sử dụng trong 1 tháng.
59) Môi trường nuôi tế bào gốc trung mô từ tủy xương chuột
Bảo quản ở 40C, sử dụng trong 1 tháng
60) Môi trường nuôi tế bào thần kinh
pH 7,4.Lọc vô trùng
- Dạng bột
- Bảo quản 2 – 70C, tránh ánh sang
- Công dụng : kích thích nang trứng phát triển.
- Pha PMSG 100 IU/ml : cân một lượng PMSG tương đương 100IU hòa vào 1 ml dung dịch NaCl 0,9%.
- Tiêm với liều 0,1 ml/chuột (tương đương với nồng độ 10IU/chuột)
b. Prenyl : Human Chrionic Gonadotropin 1500 IU (Organon, Hà Lan).
- Dạng bột
- Bảo quản : 2 -150C, tránh ánh sáng.
- Công dụng :kích thích trứng chín và rụng.
- Pha Prenyl : cân một lượng 150 IU hòa vào 1,5 ml dung dịch NaCl 0,9%
- Tiêm với liều 0,1ml/chuột (tương đương với nồng độ 10IU/chuột)
44) Môi trường loại nhân
M16
Bảo quản 2-80C, tránh ánh sáng.
51) Môi trường nuôi phôi (SOFaaBSA)
Lọc vô trùng bằng màng lọc 0.2 µm, bảo quản ở 4oC dùng trong một tuần.
52) Môi trường nuôi trứng (môi trường C2)
TCM-199 bổ sung 20% FBS
TCM-199 bổ sung 3 mg/ml BSA
Bảo quản ở 4oC, tránh ánh sáng.
55) Môi trường phục hồi sau vi tiêm
Lọc vô trùng. Bảo quản ở 40C
Để vào tủ ấm (38,50C, 5%CO2) môi trường này trước khi sử dụng ít nhất 2 giờ trước khi sử dụng và không quá 24 giờ.
68) Môi trường thu nhận phôi Blastocyst
M2
Bảo quản 2-80C, tránh ánh sáng.
69) Môi trường thụ tinh
Dung dịch Bicarbonate và HEPES chứa Heparin và Gentamycin.
Bảo quản ở 2- 8oC trong tối.
Ủ ấm 38.5oC, 5% CO2 tối thiểu 2 giờ trước khi sử dụng.
71) Môi trường thu trứng chuột
THUỐC NHUỘM
1) Thuốc nhuộm Alizarin red
Chỉnh pH về 4,1 - 4,3 bằng 0,5% ammonium hydroxide
Hoechst dạng dung dịch (H6024 0,5µg/ml, Sigma)
2) Thuốc nhuộm Alkaline phosphatase:
a. Dung dịch đệm Tris- HCl pH 8.3 0.2 M:
b. Dung dịch Napthol stock:
c. Dung dịch nhuộm:
Lọc và sử dụng ngay.
3)Thuốc nhuộm Bradford (Coomasie Blue)
a. Dung dịch Dithizon (DTZ) stock
b. Dung dịch nhuộm pH 7.8:
hòa tan stock trong PBSA với tỷ lệ 1: 10
lọc lại bằng phin lọc 0.2 µm.
5) Thuốc nhuộm DTZ:
a. Dung dịch stock DTZ:
b. Dung dịch nhuộm (pH 7,8)
Lọc lại bằng phin lọc 0,2 µm
6) Thuốc nhuộm Lillie Mayer alum haematoxylin
Khuấy đều trong 10 phút ở 370C. Lọc bằng giấy lọc Whatman.
8) Thuốc nhuộm PI (Propidium iodide)
- Dung dịch stock:
Khuấy lọc vô trùng với 0.2 µm, bảo quản ở 4oC.
- Dung dịch nhuộm:
Trộn kỹ ở nhiệt độ phòng trong 20 phút. Lọc vô trùng 0.2 µm.
10) Thuốc nhuộm Trypan blue 0,4%
Hòa tan và lọc bằng giấy Whatman
27) Nhuộm nhân tế bào crystal violet/ citric acid:
39) Eosin
40) Ethidium bromide: (10 µg/ml ethidiumbromide trong nước)
71) Phenol red 0,4%
Lọc vô trùng, bảo quản lạnh 40C

markdown:
**DUNG DỊCH** **1) β-mercaptoethanol 1M (1000X)**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
β-mercaptoethanol (14,3M)
Nước cất 2 lần
|
|
70 µl
930 µl
**2) Acid ascorbic 100X (5000µg/ml)**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Acid ascorbic
Môi trường nuôi mô
|
|
0,05 g
10 ml
Lọc vô trùng, bảo quản lạnh 4
0C và sử dụng trong vòng 1 tháng sau khi pha. **3) Ammonium acetate 10 M (CH 3COONH4):**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
CH
|
|
77 g
|
|
Nước cất 2 lần vừa đủ
|
|
100 ml
Lọc vô trùng bằng phin lọc 0.22 µm, trữ ở 4
oC hoặc nhiệt độ phòng.
Chú ý: Không hấp vô trùng vì CH
3COONH 4 bị phân hủy ở nhiệt độ cao. **4) Amphotericin B 0,1%**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Amphotericin B
Nước cất
|
|
100 mg
100 ml
Lọc vô trùng, bảo quản lạnh -20
0C **5) Ampicillin: **
Chuẩn bị dung dịch Stock nồng độ 100 mg/ml trong nước cất. Nồng độ cuối cùng sử dụng là 100 µg/ml.
Lọc vô trùng bằng phin lọc, trữ ở -20
oC. Tránh đông lạnh nhiều lần. **6) Bicarbonate 7,5%**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
NaHCO
Nước cất
|
|
7,5 g
Vừa đủ 100 ml
Bổ sung: 100 µl Pen-Strep 200X, 20 µl Ampotericin B.
**7) Biotinylated goat anti- avidin (0.5 mg/ml):**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Biotinylated goat anti- avidin
Nước cất 2 lần
|
|
0,5 mg
1 ml
Aliquot 100 µl, trữ ở -20
oC. **8) Blocking reagent:**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Blocking reagent
Tris 0.1M + NaCl 0.15M
|
|
0,05 g
10 ml
Đặt hỗn hợp trong water bath 70
oC cho đến khi tan hoàn toàn. Trữ ở -20 oC. **9) Bloodlysis buffer 20X: **(NH 4Cl 3.1 M; KHCO 3 0.2 M; EDTA 20 mM; pH 7.4)
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
NH
|
|
331 g
|
|
KHCO
|
|
40 g
|
|
milliQ water
|
|
1.6 lít
|
|
Na
|
|
14.8 g
|
|
Điều chỉnh pH
|
|
7.4
|
|
milliQ water vừa đủ
|
|
2 lít
Hấp khử trùng, trữ ở nhiệt độ phòng, sử dụng trong một năm.
**10) Dung dịch BSS ** = 9 SolA + 1 SolB **Sol A** :
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Glucose
CaCl
MgCl
KCl
Tris-base
H
pH
|
|
1g
0,7349 g ( 0,5549 g)
0,1992 g
0,4026 g
17,565 g
Vừa đủ 1000 ml
7.6
**Sol B**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
NaCl
H
|
|
4,095 g
Vừa đủ 500 ml
**11) COLAGENASE 0.075%**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Collagenase
|
|
7.5 mg
|
|
Gentamycin 200X
|
|
250 µl
|
|
Dung dịch PBS
|
|
Thêm vừa đủ 100 ml
Lọc vô bằng màng loc 0.22 µm. Bảo quản ở -4
oC. **12) Cresol Red Loading Dye 2.5X (phản ứng PCR):**
(Chứa 1M Sucrose, 0.02% cresol).
Chuẩn bị dung dịch
**Cresol Red 1%** (0.5 g/50 ml): 0.5 g Cresol Red trong 50 ml nước cất hai lần.
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Sucrose
|
|
17 g
|
|
Dung dịch Cresol Red 1%
|
|
1 ml
|
|
Nước cất 2 lần vừa đủ
|
|
49 ml
**13) Dung dịch bảo quản màng ối**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Glycerol
PBS
|
|
50 ml
Vừa đủ 100 ml
Hấp khử trùng ở 121
0C, 1 atm trong 30 phút. **14) Dung dịch cố định Carnoy **
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Acetic acid lạnh
|
|
5 ml
|
|
Methanol
|
|
15 ml
**15) Dung dịch cố định mẫu (Formaldehyde 4% đệm phosphate)**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Formaline 37 – 40%
Na
NaH
Nước cất 2 lần
|
|
100 ml
6,5 g
4 g
900 ml
**16) Dung dịch cố định mô paraformandehyde 4% PBS:**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Paraformaldehyde
PBS 1X
|
|
4 g
Vừa đủ 100 ml
Khấy đều và chỉnh pH bằng 1-2 giọt NaOH 1N để làm tan hết bột paraformandehyde. Tiếp tục khuấy và chỉnh pH 7.3 Để dung dịch nguội ở nhiệt độ phòng. Dùng ngay.
**17) Dung dịch đệm acid citric 0,1M**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
C
Nước cất 2 lần vừa đủ
|
|
0,21 g
10 ml
**18) Dung dịch đệm citrate/acetate 0,1M (pH = 6)**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Đệm Sodium acetate 0,1 M
Đệm acid citric 0,1 M
|
|
50 ml
10 ml
**19) Dung dịch đệm Sodium acetate 0,1 M**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
CH
Nước cất hai lần vừa đủ
|
|
0,6797 g
50 ml
**20) Dung dịch FSH stock 100X**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
FSH (2 ug/ml)
Nước cất hai lần
|
|
2 µg
Vừa đủ 2,8 ml
**21) Dung dịch lấy mẫu**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
PBS
Penicilline 200.000 IU/ml
Streptomycine 0,1 g/ml
|
|
198,8 ml
0,4 ml
0,8 ml
**22) Dung dịch li giải hồng cầu (pH =7,4)**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
NH
KHCO
EDTA
Nước cất 2 lần
|
|
8,28 g
1 g
0,036 g
Đủ 1000 ml
Khử trùng bằng màng lọc 0,2 µm. Bảo quản ở 4
0C, sử dụng tối đa trong 3 tuần. **23) Dung dịch li giải tinh trùng (A) (pH =7.4)**
|
|
Thành phần
|
|
Nồng độ sử dụng
|
|
Hàm lượng
|
|
KCl
Hepes
EDTA
GLycerophosphate
Dithiothreitol (DTT)
SDS
Nước cất hai lần
|
|
75 mM
20 mM
1 mM
10 mM
1 mM
0,1 %
|
|
0,1118 g
0,0953 g
0,0074 g
0,0612 g
0,0031 g
20 µl
Bổ sung vừa đủ 20 ml
Lọc vô trùng. Bảo quản trong tối ở 4
0C. **24) Dung dịch nạp mẫu DNA (Gel loading buffer)- cách 1**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Bromophenolblue
Glycerol
EDTA
Xylene cyanol
|
|
0,09 %
60%
60 mM
0,05 %
**25) Gel loading buffer 6X - cách 2**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Bromophenol Blue
|
|
0.25%
|
|
Xylene cyanol FF
|
|
0.25%
|
|
Ficoll Type 4000
|
|
15%
|
|
EDTA
|
|
120 mM
**26) Dung dịch nhược trương (0.04 M KCl, 0.025M Na citrate)**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
KCl 1M
Na citrate 1M
Nước cất 2 lần vừa đủ
|
|
0,2982 g
0,7353 g
100 ml
Bảo quản ở nhiệt độ phòng, sử dụng trong 1 tháng.
**27) Dung dịch phá tế bào (Triton X-100 0,4%)**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Triton X-100
NH
PBS
|
|
0,4 ml
0,28 ml
99,32 ml
Lọc vô trùng, bảo quản lạnh 4
0C **28) Dung dịch protein chuẩn**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Albumin
Nước cất hai lần
|
|
0,01 g
Vừa đủ 1 ml
**29) Dung dịch rửa Rinse Buffer 1X**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Tween 20
Tris-HCl
NaCl
Nước cất hai lần
|
|
50 µl
0,0315 g
0,8775 g
Vừa đủ 100 ml
**30) Dung dịch WB (glycerol đã chưng cất 10%, nước đã chưng cất 10%, v/v):**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Glycerol
|
|
100 ml
|
|
Nước cất
|
|
900 ml
Hấp khử trùng, trữ ở 4
0C. **31) Dung dịch xử lý DEPC (diethylpyrocarbonate): 0.05- 0.1% (v/v)**
Để quan đêm và hấp khử trùng. Trữ ở nhiệt độ phòng.
**32) Denhardt’s 50X:**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
BSA (bovine serum albumin fraxtion V)
|
|
2 g
|
|
Ficoll
|
|
2 g
|
|
PVP (polyvinylpyrollydone)
|
|
2 g
|
|
Nước cất vừa đủ
|
|
200 ml
Lọc khử trùng.
**33) Dispase II 0.5%**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Dispase
PBS
|
|
0,25 g
50 ml
Lọc qua màng lọc vô trùng có 0,2 µm. Bảo quản ở 4
0C **34) DNase (10U/ml)**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
DNase (50U/ml)
Dung dịch đệm 10X
EDTA 25mM
DEPC
|
|
10 µl
0,2 ml
0,2 ml
49,59 ml
Lọc vô trùng, bảo quản lạnh -20
0C **35) EDTA Stock:**
1 lít EDTA 0.5 M pH 8.0
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Disodium EDTA.2H
|
|
186.1 g
|
|
Nước cất 2 lần
|
|
800 ml
Chỉnh pH về 8.0 bằng dung dich NaOH 1N.
**36) Formaldehyde/PBS** (Formaldehyde không acid trong PBS 1X 4%):
Thêm 27 ml Formaldehyde không acid vào 223 ml PBS 1X
**37) Formamide 50%/Dextranesulphate 12.5%/SSC 2X**:
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Dextransulphate
|
|
12.5 g
|
|
Formamide khử ion 50%/SSC 2X
|
|
100 ml
Lắc đều hỗn hợp 3 giờ trong water bath 70
oC. Aliquot 1 ml, trữ ở 4 oC. **38) Formamide (de- ionized):**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Ion exchanger
|
|
5 g
|
|
Formamide 100%
|
|
100 ml
Khuấy ít nhất 2 giờ. Lọc 2 lần bằng giấy lọc Whatman. Aliquote 1 ml, trữ ở -20
oC. **39) Formamide/dextran sulphate- buffer:** *a. 50% formamide/ 20% dextran sulphate:*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Dextran sulphate
|
|
2 g
|
|
60% formamide/SSC/NaPi- buffer
|
|
10 ml
Ủ hỗn hợp ở 70
oC trong 3 giờ. Aliquot 1 ml, bảo quản ở -20oC. *b. 50% formamide/ 10% dextran sulphate- buffer:*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
50% formamide/ 20% dextran sulphate
|
|
500 µl
|
|
50% formamide/SSC/NaPi- buffer
|
|
500 µl
Trộn hoàn toàn, trữ ở 4
oC. **40) Formamide/SSC/NaPi- buffer (Formamide denaturation buffer):** *a. 70% Formamide/SSC/NaPi- buffer (70%/SSC 2X/NaPi 50 mM)*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Formamide khử ion 100%
|
|
700 µl
|
|
Dung dịch NaPi 0.5 M pH 7.0
|
|
100 µl
|
|
Dung dịch SSC 20X lọc
|
|
100 µl
|
|
Nước cất 2 lần đã lọc
|
|
100 µl
*b. 60% Formamide/SSC/NaPi- buffer (60%/ SSC 2X/NaPi 50 mM):*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Formamide khử ion 100%
|
|
600 µl
|
|
Dung dịch NaPi 0.5 M pH 7.0
|
|
100 µl
|
|
Dung dịch SSC 20X lọc
|
|
100 µl
|
|
Nước cất 2 lần đã lọc
|
|
200 µl
*c. 50% Formamide/SSC/NaPi- buffer (50%/ SSC 2X/NaPi 50 mM):*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Formamide khử ion 100%
|
|
500 µl
|
|
Dung dịch NaPi 0.5 M pH 7.0
|
|
100 µl
|
|
Dung dịch SSC 20X lọc
|
|
100 µl
|
|
Nước cất 2 lần đã lọc
|
|
300 µl
*d. 30% Formamide/SSC/NaPi- buffer (30%/ SSC 2X/NaPi 50 mM):*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Formamide khử ion 100%
|
|
300 µl
|
|
Dung dịch NaPi 0.5 M pH 7.0
|
|
100 µl
|
|
Dung dịch SSC 20X lọc
|
|
100 µl
|
|
Nước cất 2 lần đã lọc
|
|
500 µl
**41) HBSS (Hank’s Buffered Salt Solution)**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
NaCl
KCl
Glucose
Na
KH
CaCl
MgCl
NaHCO
|
|
8 g
0,4 g
1 g
0,1058 g
0,054 g
0,192 g
0,476 g
0,352 g
Lọc vô trùng. Bảo quản ở nhiệt độ phòng.
**42) HEPES 1M** (C 8H 18N 2O 4S : N-2-Hydroxyethylpiperazine-N’-2 ethane sulfonic acid)
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
HEPES
Nước cất
|
|
23,84 g
Vừa đủ 100 ml
**43) HEPES- BUFFERED SALINE:**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
HEPES 1M
|
|
0.5 ml
|
|
Glucose
|
|
0.9 g
|
|
KCl 1M
|
|
1.5 ml
|
|
Na
|
|
1 ml
|
|
NaCl
|
|
3.8 g
|
|
Dung dịch phenol red 1% (khối lượng/thể tích)
|
|
0.1 ml
|
|
Nước cất 2 lần vừa đủ
|
|
500 ml
Lọc vô trùng bằng phin lọc 0.2 µm, bảo quản ở 4
oC, sử dụng trong 1 năm. **44) IPTG (Isopropylthio- β- D- galactoside):**
Dung dịch IPTG 20% (0.8M)
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
IPTG
|
|
2g
|
|
Nước cất 2 lần
|
|
10 ml
Lọc vô trùng bằng phin lọc 0.2 µm. Aliquote 1 ml, trữ ở -20
oC. **45) Glucose 2M Stock:**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Glucose
Nước cất
|
|
36,04 g
100 ml
Lọc vô trùng.
**46) Kháng sinh**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Penicillin (4000 IU/ml)
Streptomycin (400 µg/ml)
Gentamycin (400 µg/ml)
PBS
|
|
4 ml
0,8 ml
2 ống (2ml/ống)
191,2 ml
Lọc qua màng lọc vô trùng có 0,2 µm. Bảo quản ở 4
0C **47) L-Glutamine 200 mM**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
L-Glutamine 7,25 g
NaCl
Nước cất
|
|
7,25 g
5 g
500 ml
Lọc vô trùng, bảo quản lạnh -20
0C **48) M9- buffer: (KH 2PO4, NaCl, MgSO4)**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
KH
|
|
3 g
|
|
NaCl
|
|
5 g
|
|
Nước cất vừa đủ
|
|
1 lít
|
|
Hấp khử trùng
|
|
Để nguội xuống nhiệt độ phòng
|
|
MgSO
|
|
1 ml
**49) Mg 2+ 2M Stock:**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
MgCl
|
|
20.33 g
|
|
MgSO
|
|
24.65 g
|
|
Nước cất 2 lần
|
|
100 ml
Hấp hoặc lọc vô trùng.
**50) MTT 5 mg/ml**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
MTT bột
PBS
|
|
50 mg
10 ml
Bảo quản trong tối ở 4
0C. **51) Na- acetate 3M, pH 5.6:**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Na- acetate
|
|
24.61 g
|
|
Nước cất
|
|
90 ml
|
|
Điều chỉnh pH 5.6 với acetic acid
|
|
Nước cất vừa đủ
|
|
100 ml
Trữ ở 4
oC. **52) NaAc:** *a. NaAc 3M, pH 4.8:*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
NaAc.3H2O (Sodium acetate)
|
|
408.1 g
|
|
milliQ water
|
|
600 ml
|
|
Điều chỉnh pH 4.8 bằng acid acetic
|
|
milliQ water vừa đủ
|
|
1 lít
|
|
Điều chỉnh pH 4.8 bằng acid acetic
Hấp khử trùng.
*b. NaAc 3M, pH 5.6:*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
NaAc.3H2O (Sodium acetate)
|
|
408.1 g
|
|
milliQ water
|
|
800 ml
|
|
Điều chỉnh pH 5.6 bằng acid acetic
|
|
milliQ water vừa đủ
|
|
1 lít
|
|
Điều chỉnh pH 5.6 bằng acid acetic
Hấp khử trùng.
*c. NaAc 3M, pH 6:*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
NaAc.3H2O (Sodium acetate)
|
|
40.8 g
|
|
milliQ water
|
|
70 ml
|
|
Điều chỉnh pH 6.0 bằng acid acetic
|
|
milliQ water vừa đủ
|
|
100 ml
|
|
Điều chỉnh pH 6.0 bằng acid acetic
Hấp khử trùng.
*d. NaAc 4M:*
Hòa tan 54.4 g trong 100 ml nước.
Hấp khử trùng.
**53) NaCl 5M**:
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
NaCl
|
|
292.2 g
|
|
Nước cất vừa đủ
|
|
1 lít
Hấp khử trùng.
**54) NaHCO 3 7,5%**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
NaHCO
Nước cất
|
|
7,5 g
Vừa đủ 100 ml
Hấp khử trùng ở 121
0C, 1 atm trong 30 phút. **55) NaOH 5M:**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
NaOH
|
|
200 g
|
|
Nước cất vừa đủ
|
|
1 lít
Chú ý : Phản ứng tỏa nhiệt.
**56) NaPi- buffer (sodiumphosphate) 0.5 M, pH 7.0** **a. Na 2HPO4 0.5M:**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Na
|
|
89 g
|
|
Nước cất vừa đủ
|
|
1 lít
Hấp khử trùng.
**b. NaH 2PO4 0.5 M:**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
NaH
|
|
69 g
|
|
Nước cất vừa đủ
|
|
1 lít
Hấp khử trùng.
**c. NaPi- buffer (sodiumphosphate) 0.5 M pH7:**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Dung dịch NaH
|
|
50 ml
|
|
Dung dịch Na
|
|
50 ml
Aliquot 1 ml và ủ ở -20
oC. **d. NaPi- buffer (sodiumphosphate) 0.5 M pH7.2 :**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Na
|
|
88.9 g
|
|
milliQ water
|
|
900 ml
|
|
Điều chỉnh pH 7.2 sử dụng H
|
|
milliQ water vừa đủ
|
|
1 lít
Chú ý : Sử dụng ngay sau khi pha, không lưu trữ.
**57) NaPi HYB:** Na 2HPO 4 0.125 M (pH 7.2); NaCl 0.25 M, EDTA 1 mM, SDS 7%, PEG- 6000 10%.
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
NaPi- buffer 0.5 M (pH 7.2)
|
|
1 lít
|
|
NaCl 5M
|
|
200 ml
|
|
Na
|
|
8 ml
|
|
SDS
|
|
280 g
|
|
PEG- 6000 (đun nhẹ để hòa tan)
|
|
400 g
|
|
milliQ water vừa đủ
|
|
4 lít
Sử dụng trong 6 tháng.
**58) Neutralizing- buffer pH 7.0**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
NaCl
|
|
1.5 M
|
|
Tris- HCl
|
|
0.5 M
**59) NH 4Cl 10X**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
NH
Nước cất
|
|
8,4 g
100 ml
Hấp khử trùng trong 30 phút. Bảo quản lạnh ở 4
0C. **60) N** **icotinamide 10M (100X)**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Nicotinamide
Nước cất 2 lần
|
|
1,221 g
1 ml
Pha nước ở nhiệt độ khoảng 45
0C để hòa tan hết nicotinamide. **61) PBS --**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
NaCl
KH
Na
KCl
Nước cất 2 lần vừa đủ
|
|
8 g
0,2 g
2,9384 g
0,2 g
1000 ml
pH 7.4
**62) PBS (+)**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
NaCl
KCl
KH
Na
MgCl
CaCl
Nước cất 2 lần
|
|
8 g
0,2 g
0,2 g
1,15 g
0,1 g
0,1 g
Vừa đủ 1000 ml
**63) D-PBS (Môi trường thu nhận trứng)**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
NaCl
KCl
KH
Na
MgCl
CaCl
Na pyruvate
Glucose
BSA (Sigma)
Nước cất 2 lần
|
|
8 g
0,2 g
0,2 g
1,15 g
0,1 g
0,1 g
0,036 g
1 g
3 - 4 g
Vừa đủ 1000 ml
**64) Pepsin 10%**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Pepsin
Nước cất 2 lần
|
|
10g
100 ml
Aliquot 100 µl, trữ ở -20
oC. **65) Percoll **
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Percoll
NaCl 1,5 M
Nước cất 2 lần
|
|
55 ml
10 ml
Vừa đủ 100 ml
Bảo quản ở 4
0C. **66) Phosphate buffer 0.5M, pH 7.0 = Sol 1(77ml) + Sol 2(33 ml)**
|
||
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
||
|
KH
Nước cất vừa đủ
Na
Nước cất vừa đủ
|
|
6,8045 g
100 ml
7,098 g
100 ml
**67) PMSF 1M:**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
PMSF
|
|
1.742 g
|
|
DMSO
|
|
100 ml
Nồng độ cuối sử dụng là 0.1 M. Trữ ở -20
0C **68) SB 20X (dung dịch điện di):**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
NaOH
|
|
8 g
|
|
Boric acid
|
|
40 g
Khuyến cáo: Hòa tan 8 g NaOH vào nước, sau đó cân 40 g Boric acid hòa tan vào dung dịch, tiếp tục thêm acid Boric cho đến khi pH đạt 8.0.
Thêm nước cất 2 lần cho đủ 1 lít.
**69) SDS Stock (Sodium lauryl sulfate) 20% (w/v)**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Electrophoresis – grade SDS
Nước cất vừa đủ
|
|
200 g
1000 ml
Khuấy đều và đun dung dịch ở 68
0C cho đến khi hóa chất tan hoàn toàn. Chỉnh về pH 7,2. Không được hấp khử trùng, trữ ở nhiệt độ phòng. **70) SDS 0,5%**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
SDS
PBS
|
|
0,5 g
100 ml
**71) SE- buffer 10X (NaCl 0.75 M, EDTA 0.25 M, pH 8.0)**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
NaCl
|
|
43.8 g
|
|
EDTA
|
|
89.3 g
|
|
NaOH
|
|
11 g
|
|
Nước cất
|
|
800 ml
Điều chỉnh pH 8.0
**72) Sodium Acetate 3M (CH 3COONa)** pH 5.2:
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
CH
Nước cất vừa đủ
|
|
408,3 g
1000 ml
Điều chỉnh pH về 5.2 với acid acetic lạnh. Hấp khử trùng
**73) SSC- buffer 20X (NaCl 3M, Natri citrate 0.3M):**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
NaCl
|
|
175.3 g
|
|
Na- citrate
|
|
88.2 g
|
|
milliQ water vừa đủ
|
|
1 lít
Điều chỉnh pH 7.0, hấp khử trùng, trữ ở nhiệt độ phòng,sử dụng trong 1 năm.
**74) TAE 50X:**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Tris base
|
|
242 g
|
|
Acid acetic lạnh
|
|
57.1 ml
|
|
EDTA 0.5 M
|
|
100 ml
|
|
Nước cất 2 lần vừa đủ
|
|
1 lít
**75) TALP – Hepes**
|
|
Thành phần
|
|
Nồng độ
|
|
Hàm lượng (g)
|
|
NaCl
KCl
MgCl
CaCl
NaH
NaHCO
Hepes
Glucose
Natri pyruvate
Natri Lactate
Gentamycine
Nước cất hai lần
|
|
114 mM
3,2 mM
0,5 mM
2 mM
0,4 mM
2 mM
10 mM
5 mM
0,33 mM
10 mM
10 mg/ml
|
|
0,5669
0,0238
0,0102
0,0294
0,0062
0,0168
0,2383
0,09
0,0036
0,1121
0,1121
Bổ sung vừa đủ 100 ml
**76) TALP – Hepes free Ca 2+**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
|
|
NaCl
KCl
NaHCO
NaH
Nước cất hai lần
|
|
654,5 mg
20 mg
210 mg
6,2 mg
70 ml
|
|
Dung dịch (-)
|
|
MgCl
Nước cất hai lần
|
|
10 mg
20 ml
|
|
Dung dịch (+)
|
|
Glucose
Natri lactate
Natri pyruvate
Hepes
Gentamycin
Nước cất
|
|
250 mg
121,1 mg
11 mg
120 mg
150 µl/mg
Vừa đủ 100 ml
|
|
Rót dung dịch (+) vào dung dịch (-) và khuấy đều.
Bổ sung thêm các chất sau.
**77) TBE 5X**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Tris base
|
|
54 g
|
|
Acid boric
|
|
27.5 ml
|
|
EDTA 0.5 M (pH 8.0)
|
|
20 ml
|
|
Nước cất 2 lần vừa đủ
|
|
1 lít
pH của Stock TBE 5X nên ở 8.3, lọc vô trùng với phin lọc 0.2 µm.
**78) TE buffer:**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Tris- HCl (pH 7.6- 8)
|
|
10 mM
|
|
EDTA (pH 8)
|
|
1 mM
Hấp khử trùng trong 20 phút, trữ dung dịch ở nhiệt độ phòng.
**79) Testosterone Stock 10.000X**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Testosterone (Sustanon 250 – Organon)
DMSO
|
|
100 µl
6 ml
Bảo quản lạnh ở 4
0C. **80) TN (Tris- HCl 1M, NaCl 1.5 M, pH 7.5)**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Tris- HCl
|
|
121.4 g
|
|
NaCl
|
|
87.4 g
|
|
H2O
|
|
800 ml
|
|
Điều chỉnh pH 7.5
|
|
Nước cất
|
|
1 lít
**81) TNB- buffer (Tris- HCl 0.1M, NaCl 0.15M, BMP 0.5%)**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Blocking reagent (BMP)
|
|
0.5 g
|
|
Nước cất
|
|
90 ml
|
|
Tris 1M + NaCl 1.5M (pH 7.5)
|
|
10 ml
|
|
Đun hỗn hợp ở 60oC trong 1 giờ
Aliquote 10 ml, trữ ở -20
oC. **82) TNT (Tris- HCl 0.1M, NaCl 0.15M, Tween- 20 0.05%):**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Tris- HCl 1M + NaCl 1.5M
|
|
100 ml
|
|
Tween- 20 10%
|
|
5 ml
|
|
Nước cất vừa đủ
|
|
1 lít
**83) Tris- Cl 1M:**
Hòa tan 121 g Tris Base trong 800 ml nước. Điều chỉnh pH:
a- pH 7.4 : 70 ml HCl
b- pH 7.6 : 60 ml HCl
c- pH 8.0 : 42 ml HCl
Thêm nước cất 2 lần để được thể tích cuối cùng là 1 lít. Hấp khử trùng.
**84) Trypsin/EDTA 0,25 %**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Bột Trypsin
EDTA
PBS
|
|
0,25 g
0,093 g
100 ml
Khử trùng qua màng lọc 0,2 µm. Bảo quản ở 4
0C, sử dụng tối đa trong 3 tuần. **85) X- gal 2% (w/v) Stock (5- bromo- 4- chloro- 3- indolyl- β- D- galactoside):**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
X- gal
|
|
20 mg
|
|
Dimethylformamide
|
|
1 ml
Trữ ở -20
oC, tránh ánh sáng.
**HÓA CHẤT SINH HỌC PHÂN TỬ** **MÔI TRƯỜNG NUÔI VI KHUẨN** **1) Hóa chất dùng cho nhuộm bạc gel polyacrylamide** *Dung dịch fixing 1 :*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Methanol
Acid acetic
Nước cất
|
|
50 ml
5 ml
160 ml
*Dung dịch fixing 2 :*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Methanol
Nước cất
|
|
50 ml
50 ml
Nathiosulfat 0,02 %
AgNO
3 0,2% *Dung dịch phát hiện*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Na
Formaldehyde 37%
Nước cất vừa đủ
|
|
10 g
0,54 ml
500 ml
*Dung dịch ngừng phản ứng*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Glycine
Nước cất vừa đủ
|
|
0,5 g
1 L
**2) Hóa chất dùng cho điện di SDS- PAGE** *- Tạo gel phân tích (recolving gel) 12.5%:*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Acrylamide 30%
|
|
3.2 ml
|
|
Tris- HCl 1M pH 8.8
|
|
2 ml
|
|
SDS 10%
|
|
80 µl
|
|
Nước cất 2 lần
|
|
2.6 ml
|
|
Ammonium persulfate 15%
|
|
100 µl
|
|
TEMED (bổ sung sau cùng)
|
|
20 µl
*- Tạo gel tập trung:*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Acrylamide 30%
|
|
0.75 ml
|
|
Tris- HCl 1M pH 6.8
|
|
0.625 ml
|
|
SDS 10%
|
|
50 µl
|
|
Nước cất 2 lần
|
|
3.455 ml
|
|
Ammonium persulfate 15%
|
|
100 µl
|
|
TEMED (bổ sung sau cùng)
|
|
20 µl
*- Dung dịch nạp và xử lý mẫu:*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
SDS
|
|
10%
|
|
Tris- HCl pH 6.8
|
|
125 mM
|
|
2- β- mercaptoethanol
|
|
10%
|
|
Glycerol
|
|
10%
*- Dung dịch điện di:*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Glycine
|
|
196 mM
|
|
SDS
|
|
0.1%
|
|
Tris pH 8.3
|
|
50 mM
*- Dung dịch nhuộm:*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Coomassive Brilliant Blue
|
|
0.2%
|
|
Methanol
|
|
45%
|
|
Nước cất 2 lần
|
|
45%
|
|
Acid acetic (bổ sung sau cùng)
|
|
10%
*- Dung dịch tẩy nhuộm:*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Methanol
|
|
25%
|
|
DDW
|
|
65%
|
|
Acid acetic (bổ sung sau cùng)
|
|
10%
**3) Hóa chất dùng cho kỹ thuật Southern blotting:**
- Dung dịch Depurination: dung dịch HCl 250 mM
- Dung dịch Denaturation:
+ Dung dịch NaCl 1.5 M
+ Dung dịch NaOH 0.5 M
- Dung dịch Neutralization:
+ Dung dịch NaCl 1.5 M
+ Dung dịch Tris- HCl 0.5 M, pH 7.5
**4) Hóa chất cho phản ứng MAC- ELISA:**
- Chất ngưng phản ứng H
2SO 4 1N.
- Cơ chất TMB (3, 3’, 5, 5’- tetramethylbenzidine pha với H
2O 2 theo tỷ lệ 1 : 1.
- Dung dịch đệm carbonate dùng để pha với kháng thể IgM người:
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Na
|
|
0.795 g
|
|
NaHCO
|
|
1.465 g
|
|
NaN
|
|
0.1 g
|
|
Nước cất 2 lần vừa đủ
|
|
500 ml
- Dung dịch PBS 1X.
- Dung dịch Tween 20.
**5) Hóa chất dùng trong kĩ thuật ELISA**
|
|
Dung dịch khóa phiến
|
|
BSA 1%
PBS pH 7,2
|
|
Dung dịch rửa phiến
|
|
Tween20 0,05%
PBS pH 7,2
|
|
Cơ chất TMB trong dung dịch đệm citrate/acetate
|
|
9 ml citrate/acetate
0,7 ml TMB (0,3% trong DMSO)
0,3 ml H
|
|
Dung dịch PBS pH 7,2
|
|
8,0 g NaCl
0,2 g KCl
1,8 g Na
0,24 g KH
Nước cất 2 lần vừa đủ 1000 ml
|
|
Dung dịch đệm Sodium acetate 0,1M
|
|
0,6797 g CH
Nước cất hai lần vừa đủ 50 ml
|
|
Dung dịch đệm acid citric 0,1M
|
|
0,21 g C
Nước cất hai lần vừa đủ 10 ml
|
|
Dung dịch đệm citrate/acetate 0,1M (pH 6,0)
|
|
50 ml sodium acetate 0,1M
10 ml acid citric 0,1M
|
|
Dung dịch TMB 0,3% trong DMSO
|
|
TMB 0,03 g
DMSO 10 ml
**6) Hóa chất dùng cho phản ứng tái gấp cuộn**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Tris
Glycine
EDTA
Cystein
Cystine
pH
|
|
10 mM
10 mM
1 mM
0,5 mM
0,45 mM
11,5
**7) Hóa chất tinh chế protein **
|
|
Dung dịch đệm Disodium phosphate 0,02M
Na
Nước cất hai lần
|
|
1,074 g
Vừa đủ 100 ml
|
|
Dung dịch đệm Monosodium phosphate 0,02 M
NaH
Nước cất hai lần
|
|
0,312 g
Vừa đủ 100 ml
|
|
Dung dịch đệm gắn kết (Binding buffer) sodium phosphate 0,02M (pH 7,2)
Đệm disodium phosphate 0,02M
Đệm monosodium phosphate 0,02M
NaCl
Nước cất hai lần
|
|
68,4 ml
31,6 ml
6,97 g
Vừa đủ 100 ml
|
|
Dung dịch đệm ly giải (Elution buffer) sodium citrate 0,1M (pH 3,0 – 3,5)
Đệm acid citric 0,1M
Đệm trisodium phosphate
Nước cất hai lần
|
|
35 ml
15 ml
Vừa đủ 50 ml
|
|
Dung dịch đệm trung hòa (Neutralizing buffer) (pH 8)
Tris
Nước cất hai lần
HCl 6M
|
|
3,63 g
30 ml
2 ml
|
|
Ethanol 20%
|
|
|
|
NaOH 0,5M
|
|
**8) Hóa chất cho tách chiết DNA bộ gene:**
- Dung dịch TE
- Dung dịch I : sarkosyl (1%, w/v), NaCl 0.5M, SDS (1%, w/v)
- Dung dịch PCI : phenol:chloroform:isoamylalcohol theo tỉ lệ 25:24:1
- Dung dịch Sodium acetate 3M (pH 5,2)
- Ethanol 70%
**9) Hóa chất dùng trong tách chiết DNA plasmid bằng phương pháp SDS-kiềm** *Dung dịch I* : 50 mM glucose, 25 mM Tris-HCl (pH 8), 10 mM EDTA (pH 8); hấp khử trùng 121 0C trong 15 phút, giữ trong tủ mát. *Dung dịch II* (chỉ pha trước khi sử dụng) : 0,2N NaOH; 1% (w/v) SDS; NaOH 0,2N *Dung dịch III* : 5M potassium acetate; 60 ml glacial acetic acid, 28,5ml dH 2O (pH 4,8); giữ trong tủ mát, làm lạnh trước khi sử dụng.
- RNase 1mg/ml; giữ trong tủ -20
0C.
- Phenol bão hòa trong TE (pH 8) và chloroform giữ trong tủ mát.
- Ethanol tuyệt đối và ethanol 70% (giữ ở -20
0C)
- Dung dịch TE : 100mM Tris-HCl (pH 8), 10 mM EDTA (pH 8)
- Sodium acetate 3M (pH 5,2)
**10) Hóa chất Tách chiết bộ gen vi khuẩn Gram dương**
- Dung dịch BLB (Bacillus Lysis Buffer) : NaCl 100 mM, EDTA (pH 7.5) 50mM
- Lysozyme 20 mg/ml (bảo quản ở -20
0C)
- N-lauroyl sarcosine 20%
- Phenol bão hòa trong TE (pH 8)
- Chloroform
- NaOAc 3M pH 5,2
- Ethanol 99% và 70% lạnh (giữ ở -20
0C)
- Dung dịch TE : Tris-HCl (pH 8) 10 mM, EDTA (pH 8) 1 mM
**11) Hóa chất Tách chiết DNA bộ gen nấm men**
- Lysis buffer : Tris-HCl (pH 7,5) 50 mM, β-mercaptoethanol 0,5%, EDTA (pH 8) 10 mM, lyticase 25u, RNase 1mg/ml
- SDS 10%
- Proteinase K 10mg/ml (giữ ở -20
0C)
- Phenol bão hòa trong TE (pH 8)
- Chloroform
- NaOAc 3M
- Ethanol 99% và 70% lạnh (giữ ở -20
0C)
- Dung dịch TE : Tris-HCl (pH 8) 10 mM, EDTA (pH 8) 1 mM
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
RPMI 1640
FBS
Phytohaemagglutinin
L-Glutamine
|
|
71 ml
25 ml
2,5 ml
1,5 ml
**12) Hóa chất dùng cho việc thu nhận thể vùi E.coli ** *- Dung dịch phá màng tế bào :*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Tris-HCl
EDTA
NaCl
pH
|
|
50 mM
1 mM
50 mM
8,0
*- Dung dịch rửa thể vùi* : dung dịch phá màng tế bào có bổ sung 0,5M urea. *- Dung dịch hòa tan protein ở dạng thể vùi (dung dịch A)*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Guanidine – Chloride
Tris-HCl (pH 8)
NaCl
Imidazole
pH
|
|
6 M
20 mM
500 mM
5 mM
8,0
*- Dung dịch sulfonate hóa protein*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Sodium sulfide
Sodium tetrathionate
|
|
0,3 M
0,06 M
|
|
- Dung dịch CaCl
2 100 mM, hỗn hợp dung dịch MgCl 2 20mM và CaCl 2 80mM vô trùng (giữ ở 4 0C)
- Dung dịch glycerol 80% vô trùng
- dH
2O vô trùng.
- Tinh chế sản phẩm PCR và sản phẩm cắt
- Chloroform
- NaOAc 3M pH 5,2
- Ethanol 99% và 70% lạnh (giữ ở -20
0C)
- Binding buffer, Wash solution
- MilliQ
**14) Môi trường dinh dưỡng NA (Nutrient Agar) – nuôi vi khuẩn**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Cao thịt
Pepton
NaCl
Agar
Nước cất 2 lần
|
|
3 g
5 g
5 g
18 g
1000 ml
**15) Hóa chất dung cho việc tinh sạch 10xHis MPI ở dạng biến tính** *- Dung dịch gắn:*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
NaH
Tris-HCl
Imidazone
pH
|
|
100 mM
10 mM
5 mM
8,0
*- Dung dịch rửa:*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
NaH
Tris-HCl
Imidazone
pH
|
|
100 mM
10 mM
40 mM
6,3
*- Dung dịch dung ly protein:*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
NaH
Tris-HCl
Imidazone
pH
|
|
100 mM
10 mM
500 mM
4,5
|
|
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Acid citric
ZnCl
Acetol
Nước cất đủ
pH
|
|
1 g
80 mg
16 ml
100 ml
6,2
|
|*a. Transfer buffer I 1X* ** (Tris 25 mM, Glycine 192 mM, pH 8.3) :**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Tris
|
|
3.03 g
|
|
Glycine
|
|
14.4 g
|
|
Nước cất vừa đủ
|
|
1 lít
Không điều chỉnh pH.
*b. Transfer buffer II 1X:* (Tris 25 mM, Glycine 192 mM, pH 8.3, 20% methanol)
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Tris
|
|
3.03 g
|
|
Glycine
|
|
14.4 g
|
|
Methanol
|
|
200 ml
|
|
Nước vừa đủ
|
|
1 lít
Không điều chỉnh pH.
*c. Western Buffer 10X* : (Tris 200 mM, pH 7.5) **18) Hóa chất dùng cho xác nhận sự biểu hiện protein bằng phương pháp Western Blot** *a. Dung dịch Towbin (chuyển màng):*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Tris-HCl
Glycine
SDS
Nước cất vừa đủ
Methanol (bổ sung trước khi sử dụng)
|
|
3 g
14,4 g
1 g
800 ml
200 ml
*b. Dung dịch PBST (Phosphate Buffer Saline Tween) dùng để pha loãng và rửa (pH 7,5)*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Na
NaH
NaCl
Tween 20
Nước cất vừa đủ
|
|
11,5 g
2,96 g
5,84 g
1 ml
1 L
*c. Dung dịch khóa màng (membrane blocking)*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Blocking agent (sữa gầy)
Dung dịch PBST
|
|
0,75 g
15 ml
*d. Dung dịch kháng thể sơ cấp đặc hiệu cho protein mục tiêu và kháng thể thứ cấp có đánh dấu HRP – antibody (Horseradish Peroxidase antibody):*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Kháng thể
Dung dịch PBST
|
|
1 µl
10 ml
*e. Dung dịch phát hiện phim HyperfilmTM ECL của Amersham Biosciences*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Detection agent 1
Detection agent 2
|
|
500 µl
500 µl
|
|
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
SA
DAP
Glucose
Cao nấm men
Acid ascorbic
Agar
Nước dừa già
|
|
8 g
2 g
10 g
2 g
2 g
20 g
Vừa đủ 1000 ml
pH = 7
**20) Môi trường nhân sinh khối (A2)**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
SA
DAP
Glucose
Cao nấm men
Acid ascorbic
Nước dừa già
|
|
8 g
2 g
10 g
2 g
2 g
Vừa đủ 1000 ml
pH = 4,5.
**21) MÔI TRƯỜNG LB**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Trypton
|
|
10 g
|
|
NaCl
|
|
10 g
|
|
Cao nấm men
|
|
5 g
|
|
Nước cất vừa đủ
|
|
1000 ml
Chỉnh pH 7.0 , bảo quản trong tủ -20oC. Khi dung đem hấp khử trùng 121oC trong 30 phút.
|
|
Hút 1ml môi trường agar nên cho vào mỗi giếng (đĩa 6 giếng)
Bảo quản ở 4
pH = 4,5
Hấp khử trùng và để nguội tới nhiệt độ 60
Hấp khử trùng.
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
DMEM/F12 bột (Sigma)
NaHCO
Phenol red
Nước cất 2 lần
pH
|
|
15,6 g
1,2 g
0,01 g
1000 ml
7,4
Lọc qua màng lọc vô trùng 0,2 µm. Bảo quản ở -20
0C **2) Môi trường EMEM**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Bột môi trường E’MEM
L_glutamine (200 mM)
NaHCO
HEPES (1M)
Amphotericin_B (0,1%)
Pen/Strep (200X)
Phenol red (0,4%)
Huyết thanh thai bò (FBS)
Nước cất vừa đủ
pH
|
|
4,06 g
5 ml
15 ml
10 ml
125 µl
2,5 ml
1 ml
50 ml
500 ml
7,2
**3) Hóa chất xử lí và bảo quản mẫu mô xương**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
NaH
Na
Formalin 40%
Nước cất 2 lần
Acid nitric 1%
|
|
4 g
6,5 g
100 ml
900 ml
|
|
Lọc qua màng lọc vô trùng bằng microfilter 0.22 µm, bảo quản 4
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
DMEM low glucose (D5523, Sigma)
|
|
89%
|
|
FBS (10082- 193, Gibco)
|
|
10%
|
|
kháng sinh (A5955, Sigma)
|
|
1%
|
|
Dexamethasone (D8893, Sigma)
|
|
0.5 µM
|
|
3- Isobutyl- 1- methylxathin- IBMX (I5879, Sigma)
|
|
0.5 µM
|
|
Indomethacin (I7378, Sigma)
|
|
50 µM
Bảo quản ở 4
oC, sử dụng trong 1 tuần. ** Môi trường biệt hóa mỡ:*
Môi trường DMEM/F12, 10% FBS, 1% antibiotic- antimycotic bổ sung thêm:
|
|
Dexamethasone
|
|
1 µM
|
|
Indomethacine
|
|
200 µM
|
|
Insulin
|
|
1.7 µM
|
|
Isobutyl- methylxanthine (IBMX)
|
|
500 µM
|
|
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
89% DMEM low glucose (D5523, Sigma)
|
|
|
|
10% FBS (10082- 193, Gibco)
|
|
|
|
1% kháng sinh (A5955, Sigma)
|
|
|
|
0.5 µM Dexamethasone (D8893, Sigma)
|
|
|
|
0.5 µM 3- Isobutyl- 1- methylxathin- IBMX (I5879, Sigma)
|
|
|
|
50 µM Indomethacin (I7378, Sigma)
|
|
Bảo quản ở 4
oC, sử dụng trong 1 tuần. ** Môi trường biệt hóa mỡ:*
Môi trường DMEM/F12, 10% FBS, 1% antibiotic- antimycotic bổ sung thêm:
|
|
Dexamethasone
|
|
1 µM
|
|
Indomethacine
|
|
200 µM
|
|
Insulin
|
|
1.7 µM
|
|
Isobutyl- methylxanthine (IBMX)
|
|
500 µM
|
|*a. Môi trường L- DMEM:*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
L- DMEM (D5523, Sigma)
|
|
|
|
1 mM 2- mercaptoethanol (M7522, Sigma)
|
|
|
|
10 mM Nicotiamide (N0636, Sigma)
|
|
|
|
10% FBS (10082- 139, Gibco)
|
|
Bảo quản ở 4
oC, sử dụng trong 1 tháng. *b. Môi trường H- DMEM:*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
H- DMEM (D5648, Sigma)
|
|
|
|
1 mM 2- mercaptoethanol (M7522, Sigma)
|
|
|
|
10 mM Nicotiamide (N0636, Sigma)
|
|
|
|
10% FBS (10082- 139, Gibco)
|
|
Bảo quản ở 4
oC, sử dụng trong 1 tháng. **46) Môi trường nuôi bạch cầu**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
RPMI-1640
L-Glutamin
Antibiotic
FBS
Phytohemaglutinin
|
|
100 ml
1,5 ml
1 ml
25 ml
2 ml
|
|
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Bột RPMI-1640
L-glutamine
Acid folic
Sodium bicarbonate
Nước cất 2 lần vừa đủ
|
|
10,4 g
0,3 mg
0,001 mg
2,0 mg
1000 ml
|
|
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
DMEM
|
|
500 ml
|
|
HEPES
|
|
12 ml
|
|
Huyết thanh bào thai bò (FBS)
|
|
100 ml
|
|
EGF 100 µg/ml
|
|
0.6 ml
|
|
Choleratoxin 10
|
|
0.6 ml
|
|
Hydrocortisone 100 µg/ml
|
|
2.4 ml
|
|
Penicillin (100IU/ml)/Streptomycin (100 µg/ml) 100X
|
|
6 ml
|
|
Amphotericin B 250 mg/ml
|
|
0.6 ml
|
|
Gentamicin 10 mg/ml
|
|
0.6 ml
Lọc vô trùng bằng phin lọc 0.2 µm. Bảo quản ở 4
oC trong tối. **49) Môi trường nuôi chọn lọc tế bào gốc ung thư vú**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
DMEM/F12
BSA 0,4%
Insulin
EGF
bFGF
|
|
90 ml
10 ml
5 ng/ml
20 ng/ml
10 ng/ml
**24) Môi trường biệt hóa tế bào tiết Insulin:** *Môi trường L-DMEM ,bổ sung :*
- 10% FBS
- 10 mmol/l Nicotinamide
- 1 mmol/l β-mercaptoethanol
- 20 ng/ml EGF
*Môi trường L-DMEM, bổ sung:*
- 10% FBS
- 10 nmol/l exendine-4
- Môi trường H-DMEM, bổ sung
- 10% FBS
- 10
-6 mol/l acid retinoic *Môi trường H-DMEM, bổ sung 10% FBS*
|
|*a. BO- A:*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
PBS 1X
|
|
9.6 g
|
|
Muối kim loại
|
|
1 ml
|
|
Natri pyruvate
|
|
0.036 g
|
|
Glucose
|
|
1 g
*b. BO- B:*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
D- PBS
|
|
97 ml
|
|
Calf serum
|
|
3 ml
|
|
Penicillin
|
|
10000 IU
|
|
Streptomycin
|
|
10 mg
*c. Môi trường BO:*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
BO- A
|
|
7.4 ml
|
|
BO- B
|
|
2.4 ml
|
|
Heparin
|
|
20 µl
|
|
Natri pyruvate
|
|
100 µl
|
|
Cafein benzoate
|
|
0.03884 g
|
|
Gentamycin 4 mg/ml
|
|
120 µl
**63) Môi trường tạo sphere**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Môi trường DMEM/F12 không huyết thanh
|
|
|
|
bFGF
|
|
10 ng/ml
|
|
EGF
|
|
20 ng/ml
|
|
Insulin
|
|
5 µg/ml
|
|
BSA
|
|
0.4 %
**Hỗ trợ sinh sản** **28) Dung dịch phá cumulus (Hyaluronidase 1,0 mg/ml)**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Hyaluronidase (Sigma)
PBS (-)
|
|
10 mg
Vừa đủ 10 ml
**29) Dung dịch pha loãng tinh trùng**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
NaHCO
Formol 36-40%
Trypan Blue
Nước cất
|
|
50 g
10 ml
0,25 g
Vừa đủ 1000 ml
**27) Môi trường chất bảo quản đông lạnh** *Dung dịch CPA 1 (0,7M DMSO + 0.9 EG)*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
TCM-199 đã bổ sung 10% FBS
DMSO
EG
|
|
9,265 ml
500 µl
235 µl
Lọc vô trùng. Bảo quản ở 4
0C. *Dung dịch CPA2 (1,4M DMSO + 1,8 EG)*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
TCM-199 đã bổ sung 10% FBS
DMSO
EG
|
|
8,53 ml
1000 µl
470 µl
Lọc vô trùng. Bảo quản ở 4
0C. *Dung dịch CPA3 (2,1M DMSO + 2,7 EG + 0,1M D-Glucose)*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
TCM-199 đã bổ sung 10% FBS
DMSO
EG
D-Glucose
|
|
7,795 ml
1500 µl
705 µl
0,2 g
Lọc vô trùng. Bảo quản ở 4
0C.
- Môi trường giải đông chính là môi trường đông lạnh nhưng thứ tự đảo ngược thứ tự là CPA-3, CPA-2, CPA-1 và cuối cùng là môi trường TCM-199 bổ sung 20%FCS (môi trường dùng trong IVM)
**28) Môi trường CR1aa **(dùng nuôi phôi sau khi thụ tinh). *a. CR1aa- A:*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
NaCl
|
|
6.7031 g
|
|
KCl
|
|
0.2311 g
|
|
Natri pyruvate
|
|
0.044 g
|
|
NaHCO3
|
|
2.2011 g
|
|
Phenol red (10 µg/ml)
|
|
0.01
|
|
Nước cất 2 lần vừa đủ
|
|
770 ml
*b. CR1aa- B:*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Hemicalcium lactate
|
|
0.5996 g
|
|
Nước cất 2 lần thêm vừa đủ
|
|
200 ml
*c. Môi trường CR1aa:*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
CR1aa- A
|
|
77 ml
|
|
CR1aa- B
|
|
20 ml
|
|
BME (Essential Amino Acid) 100X
|
|
1 ml
|
|
MEM (Non Essential Amino Acid) 100X
|
|
1 ml
|
|
L- Glutamic acid(20 mg/ml)
|
|
1 ml
|
|
Bovine Serum Albumine 3 mg/ml
|
|
|
|
Penicillin- G 100IU/ml
|
|
10000 IU
|
|
Streptomycin Sulfate 100µg/ml
|
|
100 mg
|
|
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
DMEM
F12
EGF
FGF
BSA
FSH
Testosteron
|
|
5 ml
5 ml
200 ng
100 ng
10 mg
100 µl
1 µl
**40) Môi trường IVF**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
TCM-199
D-glucose
Calcium lactate
Sodium pyruvate
Potassium penicillin G
Streptomycin sulfate
Fetal calf serum
|
|
9,78 g/l
3,05 mM
2,92 mM
0,91 mM
75 µg/ ml
50 µg/ml
10 %
|
|
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng (g/L)
|
|
NaCl
KCl
KH
MgSO
Sodium lactate
Glucose
Penicillin
Streptomycin
Sodium pyruvate
NaHCO
CaCl
L-glutamine
EDTA
BSA
Nước cất 2 lần
|
|
5,553
0,186
0,048
0,049
1,87 ml
0,036
0,06
0,05
0,022
2,1
0,252
5 ml
0,004
1
999,13 ml
|
|
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Bột L15
|
|
13.8 g
|
|
Bột M199
|
|
9.5 g
|
|
HEPES
|
|
3.57 g
|
|
Taurine
|
|
0.128 g
|
|
Acid Ascorbic
|
|
0.04 g
|
|
Nước cất 2 lần
|
|
1000 ml
Chuẩn pH 7.4, lọc vô trùng bằng màng lọc 0.2 µm, bảo quản trong tối ở 4oC
**43) Môi trường L-DMEM bổ sung dịch chiết tụy**
- L-DMEM (D5523, Sigma)
- 10% FBS (10082-139, Gibco)
- Dịch chiết mô tụy
- Bảo quản ở 4
0C, sử dụng trong 1 tháng. **58) Môi trường nuôi tế bào gốc trung mô máu cuống rốn**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
IMDM (I7633, Sigma)
|
|
890 ml
|
|
FBS (10082- 139, Gibco)
|
|
100 ml
|
|
Antibiotic- antimycotic (A5955, Sigma)
|
|
10 ml
Bảo quản ở 4
oC, sử dụng trong 1 tháng. **59) Môi trường nuôi tế bào gốc trung mô từ tủy xương chuột**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
DMEM/F12 (51445-1000ML, Sigma)
FBS (10082-139, Gibco)
Antibiotic-antimycotic (A5955, Sigma)
|
|
890 ml
100 ml
10 ml
Bảo quản ở 4
0C, sử dụng trong 1 tháng **60) Môi trường nuôi tế bào thần kinh**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
DMEM/F12
FBS (GIBCO)
Insulin (Merck)
EGF
FGF (5000 ng/ml)
Kháng sinh
|
|
89 ml
10 ml
10 µl
10 µl
200 µl
1 ml
pH 7,4.Lọc vô trùng
|
|
- Dạng bột
- Bảo quản 2 – 7
0C, tránh ánh sang
- Công dụng : kích thích nang trứng phát triển.
- Pha PMSG 100 IU/ml : cân một lượng PMSG tương đương 100IU hòa vào 1 ml dung dịch NaCl 0,9%.
- Tiêm với liều 0,1 ml/chuột (tương đương với nồng độ 10IU/chuột)
**b. Prenyl :** Human Chrionic Gonadotropin 1500 IU (Organon, Hà Lan).
- Dạng bột
- Bảo quản : 2 -15
0C, tránh ánh sáng.
- Công dụng :kích thích trứng chín và rụng.
- Pha Prenyl : cân một lượng 150 IU hòa vào 1,5 ml dung dịch NaCl 0,9%
- Tiêm với liều 0,1ml/chuột (tương đương với nồng độ 10IU/chuột)
**44) Môi trường loại nhân**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
TALP – Hepes free Ca
Polyvinylpyrolidone
Demecolcine
Cytochalasin B
|
|
0,3%
0,4 µg/ml
5 µg/ml
|
|
M16
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
NaCl
NaHCO
Glucose
KCl
Na
Sodium piruvat
Penicillin
Streptomycin
CaCl
MgCl
Sodium lactate
Phenol Red
|
|
5,803 g/ml
2,106 g/ml
1,000 g/ml
2,101 g/ml
0,056 g/ml
0,055 g/ml
0,063 g/ml
0,050 g/ml
0,264 g/ml
0,102 g/ml
2,610 g/ml
0,100 g/ml
Bảo quản 2-8
0C, tránh ánh sáng. **51) Môi trường nuôi phôi (SOFaaBSA)**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Thành phần S2
|
|
10 ml
|
|
NaHCO3 250 mM
|
|
10 ml
|
|
Natri pyruvate 33 mM
|
|
1ml
|
|
CaCl2.2H2O 171 mM
|
|
1 ml
|
|
MgCl2.6H2O
|
|
1 ml
|
|
Natri lactate 330 mM
|
|
1 ml
|
|
Glucose 60 mM
|
|
2.5 ml
|
|
L- Glutamine 10mM
|
|
10 ml
|
|
Amino acid không thiết yếu
|
|
1 ml
|
|
Amino acid
|
|
2 ml
|
|
MilliQ H2O
|
|
60.5 ml
|
|
Osmolarity
|
|
265- 275
|
|
pH
|
|
7.4
|
|
BSA (FAF)
|
|
0.8 g
Lọc vô trùng bằng màng lọc 0.2 µm, bảo quản ở 4oC dùng trong một tuần.
**52) Môi trường nuôi trứng (môi trường C2)**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
TCM 199
FBS
EGF
Gentamycin
Natri pyruvate
hCG
|
|
17,4 ml
2 ml
40 µl
60 µl
500 µl
0,5 IU/ml
|
|*TCM-199 bổ sung 20% FBS*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
TCM-199 (Sigma)
FBS (GIBCO)
Gentamycin
|
|
80 ml
20 ml
0,125 ml
*TCM-199 bổ sung 3 mg/ml BSA*
|
|
Thành phần
|
|
Hóa chất
|
|
TCM-199 (Sigma)
BSA (Sigma)
Gentamycin
|
|
100 ml
300 mg
0,125 ml
|
|
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
TCM- 199
|
|
19.5 ml
|
|
FBS
|
|
5 ml
|
|
Gentamycin
|
|
62.5 µl
|
|
Natri pyruvate
|
|
0.5 ml
|
|
Folltropin
|
|
125 µl
Bảo quản ở 4
oC, tránh ánh sáng. **55) Môi trường phục hồi sau vi tiêm**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
TCM-199
FBS
|
|
10%
|
|
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
TCM-199
FBS
|
|
90 ml
10 ml
|
|
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
DMEM
FBS
Penicillin/Streptomycin
Glutamax
NEAA
βME
bFGF
|
|
4,5 g/l
20%
1 X
1 X
1 X
1 X
10 ng/ml
|
|
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
TCM-199
FBS
Kháng sinh
FSH
Testosteron
|
|
8,9 ml
1 ml
100 µl
100 µl
1 µl
|
|
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
TCM-199
D-Glucose
Calcium lactate
Sodium pyruvate
Potassium penicillin G
Streptomycin sulfate
Fetal calf serum
Pregnance Mare Serum Gonadotropin-PMSG
Human chorionic gonadotropin-hCG
L-Cystein (pH7)
|
|
9,78 g/l
3.05 mM
2.92 mM
0,91 mM
75 µg/ml
50 µg/ml
10% (5%, 20%)
10 IU/ml
10 IU/ml
0.57 mM
|
|
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
TCM-199
FBS
CB
|
|
10 %
7,5 µg/ml
|
|
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Dung dịch D-PBS
Heparine
Penicillin
Streptomycin
|
|
100 ml
400 mg
10.000 IU
10 mg
Lọc vô trùng. Bảo quản ở 4
0C
Để vào tủ ấm (38,5
0C, 5%CO 2) môi trường này trước khi sử dụng ít nhất 2 giờ trước khi sử dụng và không quá 24 giờ. **68) Môi trường thu nhận phôi Blastocyst**
M2
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
NaCl
KCl
KH
MgSO
Sodium lactase
Glucose
Penicillin
Streptomycin
|
|
5,534 g/ml
0,356 g/ml
0,162 g/ml
0,293 g/ml
2,610 g/ml
1,000 g/ml
0,06 g/ml
0,05 g/ml
Bảo quản 2-8
0C, tránh ánh sáng. **69) Môi trường thụ tinh**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Sodium Chloride
|
|
0.58 g
|
|
Sodium Bicaronate
|
|
0.2106 g
|
|
Glucose
|
|
0.1 g
|
|
Potassium Chloride
|
|
0.21 g
|
|
Sodium di- Hyrogen Phosphate
|
|
0.0056 g
|
|
Sodium Pyruvate
|
|
0.0056 g
|
|
Penicillin
|
|
0.0063 g
|
|
Streptomycin
|
|
0.005 g
|
|
Calcium Chloride
|
|
0.01993 g
|
|
Magnesium Sulphate.6H2O
|
|
0.0102 g
|
|
Sodium Lactate
|
|
0.35 ml
|
|
Phenol red
|
|
0.1 mg
|
|
Nước cất vừa đủ
|
|
100 ml
|
|
Dung dịch Bicarbonate và HEPES chứa Heparin và Gentamycin.
Bảo quản ở 2- 8oC trong tối.
Ủ ấm 38.5oC, 5% CO2 tối thiểu 2 giờ trước khi sử dụng.
**71) Môi trường thu trứng chuột**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Flushing chứa 0.4% HAS + HEPES
|
|
100 ml
|
|
IVF/FIVchứa 0.4% HSA
|
|
50 ml
|
|
Hyaluronidase trong flushing 80 IU chứa hyaluronidase, 0.4% HSA+ HEPES
|
|
10 ml
|
|
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
TALP – Hepes free Ca
Polyvinylpyrolidone
Demecolcine
Sucrose
|
|
0,3 %
0,4 µg/ml
0,05 M
**THUỐC NHUỘM** **1) Thuốc nhuộm Alizarin red**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Alizarin red
Nước cất
|
|
2,0 g
100 ml
Chỉnh pH về 4,1 - 4,3 bằng 0,5% ammonium hydroxide
Hoechst dạng dung dịch (H6024 0,5µg/ml, Sigma)
**2) Thuốc nhuộm Alkaline phosphatase:** *a. Dung dịch đệm Tris- HCl pH 8.3 0.2 M:*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
0.2 M Tris
|
|
|
|
0.1 N HCl
|
|
|
|
Nước cất
|
|
55 ml
*b. Dung dịch Napthol stock:*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Napthol ASBI phosphate
|
|
25 mg
|
|
N: N Dimethyl formamide
|
|
10 ml
|
|
Nước cất
|
|
10 ml
|
|
Chuẩn về pH 8 với sodium carbonate 1M
|
|
|
|
Tris- HCl 0.2 M
|
|
180 ml
*c. Dung dịch nhuộm:*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Napthol ASBI stock
|
|
10 ml
|
|
Fast Red TR
|
|
1 mg
Lọc và sử dụng ngay.
**3)Thuốc nhuộm Bradford (Coomasie Blue)**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Ethanol 95%
Coomasie Brilliant Blue
H
Nước cất
|
|
5 ml
0,01 g
10 ml
Vừa đủ 100 ml
|
|*a. Dung dịch Dithizon (DTZ) stock*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Dithizon (D5130, Sigma)
|
|
10 mg
|
|
Dimethyl sulfoxide (DMSO) (Merck)
|
|
10 ml
*b. Dung dịch nhuộm pH 7.8:*
hòa tan stock trong PBSA với tỷ lệ 1: 10
lọc lại bằng phin lọc 0.2 µm.
**5) Thuốc nhuộm DTZ:** *a. Dung dịch stock DTZ:*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
DTZ (Dithizon) (D5130, Sigma)
DMSO (Merck)
|
|
10 mg
10 ml
*b. Dung dịch nhuộm (pH 7,8)*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Dung dịch stock DTZ
PBS
|
|
1 ml
9 ml
Lọc lại bằng phin lọc 0,2 µm
**6) Thuốc nhuộm Lillie Mayer alum haematoxylin**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Aluminium ammonium sulphate
Haematoxylin (CI 75290)
Ethanol
Sodium iodate
Acetic acid
Glycerol
Nước cất 2 lần
|
|
20 g
0,2 g
4 ml
0,4 g
8 ml
120 ml
280 ml
|
|
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Oil red (Sigma)
Isopropanol (Merck)
|
|
0,1 g
20 ml
Khuấy đều trong 10 phút ở 37
0C. Lọc bằng giấy lọc Whatman. **8) Thuốc nhuộm PI (Propidium iodide)**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Natri citrate
PI (Propidium iodide)
PBS
|
|
3,8 mM
50 µg
1 ml
|
|*- Dung dịch stock:*
|
|
Thành phần
|
|
Hóa chất
|
|
Sudan Black (Sigma)
|
|
0,7 g
|
|
Isopropanol
|
|
200 ml
Khuấy lọc vô trùng với 0.2 µm, bảo quản ở 4
oC. *- Dung dịch nhuộm:*
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Sudan black stock
|
|
6 phần
|
|
H
|
|
4 phần
Trộn kỹ ở nhiệt độ phòng trong 20 phút. Lọc vô trùng 0.2 µm.
**10) Thuốc nhuộm Trypan blue 0,4%**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Trypan blue (Merck)
PBS
|
|
0,4 g
100 ml
Hòa tan và lọc bằng giấy Whatman
**27) Nhuộm nhân tế bào crystal violet/ citric acid:**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Citric acid
|
|
2.1 g
|
|
Crystal violet
|
|
0.1 g
|
|
Nước cất 2 lần vừa đủ
|
|
100 ml
**39) Eosin**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Eosin Y
Cồn 95%
Acid acetic
|
|
0,5 g
100 ml
Vài giọt
**40) Ethidium bromide**: (10 µg/ml ethidiumbromide trong nước) **71) Phenol red 0,4%**
|
|
Thành phần
|
|
Hàm lượng
|
|
Phenol red
Nước cất
|
|
0,2 g
50 ml
Lọc vô trùng, bảo quản lạnh 4
0C

P3P: CP="NOI ADM DEV PSAi COM NAV OUR OTRo STP IND DEM"

Content-Encoding: x-gzip

X-Content-Encoded-By: Joomla! 1.5

Set-Cookie: ja_zeolite_tpl=ja_zeolite; expires=Tue, 13-Oct-2015 07:54:40 GMT; path=/


text:
- 10:04 AM 17/05/2007 #61
Hi!!!!!!!
Chào bạn!
Mình đã có một bé gái, 16 tuần siêu âm là có thể biết được trai hay gái rồi đó. Mình siêu âm của nhóm Bác sĩ BVPS Từ Dũ ở đường Nguyễn Trãi. Ở đây siêu âm rất đông, chính xác lắm và bác sĩ rất vui tính. Siêu âm 4D giá mắc hơn chút đỉnh nhưng được nhìn thấy em bé rõ lắm, dễ thương vô cùng... Bác sĩ sẽ chép ảnh em bé lưu trữ vào CD để bạn có thể giữ làm kỷ niệm cho bé. Siêu âm còn giúp bạn biết đưộc tương đối chính xác: chiều dài, cân nặng của em bé. Chúc bạn vui!!!!
-
- 10:47 AM 17/05/2007 #62
[QUOTE=momo;887268]Hôm 13 tuần, tớ siêu âm chỗ bác Cường, bé nhà tớ nó quay lưng thế này này, bác bảo khả năng lớn là con gái. Không hiểu sao bác nhìn ra được.
Bây giờ 15 tuần đã chính xác hơn chưa nhỉ?
15 tuần chắc là cũng biết rồi đấy mẹ nó ạ. Hôm mình sa 16tuaan nhìn rõ lắm rồi. Hôi 12 tuần sa bác sỹ Cường, tư thế em bé nhà mình cũng y như vậy đấy ,à bác sỹ phán có khả năng con trai. Hình như bác sỹ căn cứ vào kích thước xương đùi và lưỡng đỉnh để dự đoán thì phải. Muốn chắc ăn mẹ nó để 16 tuần hãy sa.
- 03:51 PM 17/05/2007 #63
[QUOTE=Me Comfort;888707]
- 09:04 AM 19/05/2007 #64
Bạn cứ đi siêu âm đi, không sao đâu. Mình đây 11 tuần 5 ngày đi siêu âm 4D để biết giới tính vì chị mình bảo 12 tuần lần trước là chị ý biết được rồi. Nhưng lần đấy mình siêu âm trong Phòng khám dịch vụ của Viện C (56 H.B.Trưng), bsỹ bảo còn bé nên chưa biết (mình nghĩ là trong viện cấm nói vì mình nhìn thấy em bé cũng rõ thân hình rồi). Hôm vừa rồi mình lại đi siêu âm 4D tiếp, lúc đó là 15 tuần 4 ngày. Lúc đầu mình cũng hơi lo vì 2 lần sát nhau quá, nhg vì mình cũng muốn biết trước ngày sinh nhật mình nên mình quyết định đi (vì nhiều ng cũng bảo ko sao cả). Mình khám ở Phòng khám Hoa Hồng (số 2 Triệu Quốc Đạt), vừa "soi" cái bsỹ đã bảo giống bố rồi làm mình vui quá. Bsỹ bảo thường thì 12 tuần là biết được rồi (đối với đứa trẻ phát triển nhanh) ko thì 14,15 tuần trở đi là rõ, nếu là thai trai thì phát triển rõ và độ chính xác cao nhất. Chúc vợ chồng bạn được như mong muốn.
- 09:55 AM 19/05/2007 #65
Mình cảm ơn mẹ 023313328 nhiều nhé! sẵn đây cho mình hỏi là siêu âm ở bác sĩ BVPS Từ Dũ có siêu ngày chủ nhật không? và thời gian làm việc ở đó thế nào để mình sắp xếp mình đi. Vì mình ở tận dưới Đồng Nai lận. Hồi mới có thai được khoảng 2 tuần mình có bị cảm, ho (không sốt ) nhưng mình không dám uống thuốc, chỉ dám ăn tắc chấm muối và đồ chua để giải cảm thôi, mình không biết cảm ho như vậy có ảnh hưởng đến em bé không nhỉ? Lo lắng quá đi, hôm mình siêu âm lúc được 16 tuần thì bác sĩ nói rằng thai khỏe, tốt . Nhưng mình nghe các mẹ trong diễn đàn bảo là đến 22 tuần siêu âm hình thái học sẽ biết được dị tật thai nhi. Mình sẽ cố gắng lên SG để siêu âm 4D xem sao. Cảm ơn các mẹ thật nhiều nhe!
- 09:50 AM 20/05/2007 #66
Các mẹ à!
Em đang có bầu ở tuần 12. Hôm qua e vừa đi siêu âm ở chỗ Bác sỹ Cường xong. Em bé khỏe mạnh và bình thường. Lúc em hỏi giới tính, bác sỹ trả lời là 70%là con trai. Không bít có đúng ko các mẹ nhỉ. Hix với em thì con gái hay con trai đều được nhưng ông bà nội, ngoại và bố cháu mong con trai lắm. Nhiều lúc áp lực ghê, bác sỹ nói thế em cũng vui nhưng cũng lo khi thấy mọi người mừng vui quá. Lỡ rơi vào 30 % thì tội cho em bé lắm (bây giờ đã suốt ngày bị gọi là cu Nhím roài.)Mẹ Bi ơi, mẹ Bi của Nhím đâu ồi ồi....:LoveStruc:
- 10:32 AM 28/05/2007 #67
Bé của mình được 14w rồi, nôn biết giới tính của bé quá! Ở SG thì sa ở bác sỉ nào biết sớm & chính xác nhỉ!
- 10:48 AM 28/05/2007 #68
Tuần 20 m cg siêu âm của Bs Cường ở Đ.B.Phủ, bác bảo cháu trai but cg vẫn chưa yên tâm lắm nên chỉ bảo cả nhà là "ku" rùi but fải cần them time cho chắc chắn. Như thế m cũng thoải mái hơn thanhthaotim a. Chịu khó chờ thêm chút time rùi siêu âm tiếp nhé.
M là bé đầu tiên, siêu âm trông thấy con thích lắm!!! hihi:Battin ey:
Chúc mẹ cháu như ý nhé
- 11:08 AM 28/05/2007 #69
Chúc mẹ con vui khỏe.
- 11:17 AM 28/05/2007 #70
Vậy siêu âm 11 tuần BS nói là chắc con gái quá thì thế nào nhỉ?
- 09:28 AM 29/05/2007 #71
Có khi nào bs Cường đoán giới tính sai không nhỉ? Mình đang hi vọng bác ấy nói nhầm đây, nhưng chắc không thể được vì hôm trước SA 4D con mình được 16 tuần 5 ngày rồi, bs nói là "gái". Về nhà buồn quá, vì thấy ai cũng thích con trai, ai cũng SA là con trai, ox mình cũng thích con trai, và mình cũng thích con trai năm ĐInh Hợi, cho con đỡ khổ. Chẳng biết làm sao.
- 09:35 AM 29/05/2007 #72
- 09:36 AM 29/05/2007 #73
- 09:37 AM 29/05/2007 #74
- 11:21 AM 29/05/2007 #75
em mới có khoảng 6 tuần, xem lịch trên thì ra thằng Ku, không biết thế nào cả. Phải đợi sau này SA sau.
- 11:54 AM 29/05/2007 #76
- 01:16 PM 29/05/2007 #77
Baby của mình giống bố nó bạn ạ!
Để mình gửi cho bạn bài báo này nhé!
Sinh con, chọn tuổi
Mấy năm lại đây, đâu đâu cũng thấy kể chuyện sinh con, chọn năm, chọn tháng, chọn giờ rồi thậm chí chọn cả người đỡ đẻ.
Năm nay, một lần nữa thiên hạ kháo nhau sinh con năm Đinh Hợi vì cho rằng năm nay là năm "heo vàng".
Những người tuổi này, đặc biệt là con trai, thường thành đạt và may mắn. Theo quan niệm xưa "Trai Đinh, Nhâm, Quý thì tài", nhiều bậc cha mẹ luôn mong ước và cố gắng để sinh cho được một quý tử vào đúng năm Đinh Hợi.
Cũng giống như cuối năm 2005, có tin đồn cho rằng năm 2006 là năm "chó vàng" khiến cho nhiều người cả tin chọn năm đó làm năm tiến hành các việc đại sự, họ luận rằng: bản chất con chó là trung thành mà là "chó vàng" thì đúng là ào ào tiền bạc tới.
Thực chất của vấn đề là do người xưa dùng 10 Thiên can gồm Giáp, Ất, Bính, Đinh, Mậu, Kỷ, Canh, Tân, Nhâm, Quý; kết hợp với 12 Địa chi gồm 12 con giáp làm con vật biểu trưng (Tý (chuột), Sửu (trâu - bò), Dần (hổ), Mão (mèo), Thìn (rồng), Tỵ (rắn), Ngọ (ngựa), Mùi (dê), Thân (khỉ), Dậu (gà), Tuất (chó), Hợi (lợn), để tính năm, tháng, ngày, giờ sử dụng trong cuộc sống, cũng để sử dụng trong xem vận số cho mỗi con người. Tức là lấy 10 Thiên can phối hợp với 12 Địa chi để tạo thành, mở đầu là Giáp Tý kết thúc là Quý Hợi, sáu mươi năm lại quay lại một tuổi.
Người ta đang quá mong mỏi mọi việc tốt đẹp, phát tài, phát lộc nên đặt cho các năm thành Kim (vàng) hết. Ví dụ: 2006 thì thành chó vàng - Kim Cẩu. Năm 2007 thì lại biến thành Kim Trư - lợn vàng.
Thức ra, đây là cách chơi chữ đồng âm của người xưa để nói lên mong ước của mình. Chữ Kim (hiện tại - ngày nay) được thay thế bởi chữ Kim (vàng) nên khi nói "Kim niên Đinh Hợi" đúng ra phải hiểu là - năm nay là năm Đinh Hợi, nhưng một số người lại hiểu nhầm một cách cố ý thành "năm lợn vàng". Nếu vậy thì 12 con giáp của các năm sẽ đều là "vàng" (Kim) cả. Các nhà thống kê xã hội học cũng đã cho rằng danh nhân tuổi Đinh Hợi cũng chỉ tương đương với các danh nhân cầm tinh 11 con giáp còn lại.
Để sinh con vào năm này, nhiều đôi trai gái đã quyết định cưới nhau vội vã, cho dù tuổi còn ít, điều kiện kinh tế, công việc chưa ổn định. Nên khi cưới nhau về vợ chồng lại xung đột, tranh cãi do chưa hiểu hết về nhau, hoặc do kinh tế eo hẹp. Thậm chí nhiều đôi lại mâu thuẫn cho rằng năm nay chưa cưới nhau được, nhưng lại chấp nhận có con trước mà chưa hề cưới hỏi, hay có sự chuẩn bị nào để làm bố, làm mẹ cả.
Thậm chí nhiều người tính năm tính tháng cho tốt giờ, đúng con trai, nhiều sản phụ mang thai từ năm trước muốn sinh con năm Đinh Hợi đã áp dụng các biện pháp để "hãm" ngày sinh chờ qua giao thừa. Sướng đâu chưa thấy, làm như vậy rất nguy hiểm cho tính mạng, cũng như sức khoẻ con trẻ.
Để có con tuổi Đinh Hợi nhiều người đã làm những việc thất đức. Họ cho năm Đinh Hợi sinh con trai mới tốt, con gái không tốt nên nhiều người tìm mọi cách để sinh con trai. Khi siêu âm ra con gái thì vợ chồng lại xung khắc, đổ lỗi cho nhau, mâu thuẫn trong gia đình nảy sinh, mất hạnh phúc, thậm chí, nhiều người còn bỏ thai, đánh mất hạnh phúc gia đình, tước đi mầm sống của con.
Việc đua nhau sinh con vào năm Đinh Hợi sẽ khiến các bệnh viện, trạm xá quá tải gây khó khăn cho việc chăm sóc sản phụ. Các điều kiện dịch vụ thiết yếu đi kèm cũng khó đáp ứng đầy đủ, nên việc nuôi dưỡng, đặc biệt là tìm trường học cũng như xin việc làm cho cái con sau này rất khó khăn, nhất là ở các thành phố, ngoài ra, còn ảnh hưởng xấu tới các yếu tố khác như: môi trường, anh ninh trật tự, tệ nạn xã hội…
Một đứa trẻ có tương lai tốt, chỉ khi nó được sinh ra và lớn lên trong tình yêu thương, giáo dục của cha mẹ, được chăm sóc khoẻ mạnh ngay từ khi trong lòng mẹ.
(Theo UB Dân số, Gia đình & Trẻ em Hà Tĩnh)
Và trong bài báo này, người ta cũng nói rằng sinh năm tốt là năm đó em bé được chú trọng chăm sóc để phát triển tốt hơn thôi chứ người ta có quan trọng con trai con gái đâu!"Thực hư chuyện chọn năm để sinh con
Website chính thức của Ngân hàng Thế giới đã công bố một công trình nghiên cứu của hai chuyên gia người Việt về năm sinh và ảnh hưởng của nó đến sự phát triển con người.
Hai tác giả của công trình “nghiên cứu tử vi” này là Tiến sĩ Đỗ Quý Toàn - Nhóm nghiên cứu kinh tế phát triển - Ngân hàng Thế giới tại Washington (Mỹ), và Thạc sĩ Phùng Đức Tùng - Chuyên viên Vụ Xã hội Môi trường - Tổng cục Thống kê, điều trùng hợp đầu tiên về năm sinh là cả hai tác giả đều sinh năm 1974.
Nghiên cứu mang tựa đề “Mê tín, kế hoạch hoá gia đình và phát triển con người” (Superstition, Family Planning, and Human Development), hai tác giả đã đề cập hiện tượng bùng nổ trẻ em sinh ra vào những năm được coi là năm tốt (theo tử vi) không chỉ ở Việt Nam mà ở cả Trung Quốc, Đài Loan hay Hồng Kông.
Sau đó, các tác giả kiểm định xem liệu có đúng là ở Việt Nam cha mẹ thường chọn năm sinh cho con và liệu những đứa trẻ sinh năm tốt có phát triển tốt hơn những đứa trẻ sinh vào các năm khác về các yếu tố phát triển con người như y tế và giáo dục?
Nếu có sự khác biệt về phát triển con người giữa trẻ sinh năm tốt và trẻ sinh vào các năm khác thì yếu tố nào có thể lý giải được sự khác biệt này? Tại sao việc chọn năm tốt để sinh con vẫn tồn tại và các vấn đề về chính sách cần đặt ra đối với hiện tượng này là gì?
Giáo sư kinh tế Trần Hữu Dũng (Đại học Wright State Dayton, Mỹ) cho hay công trình nghiên cứu của hai tác giả trẻ tuổi này đã có được tiếng vang rất tốt khi công bố tại Mỹ, được nhiều tờ báo thuật lại như Boston Globe, Washington Post, Atlantic…
Khi năm mới Đinh Hợi sắp đến với mọi nhà, chúng tôi đã “tranh thủ” được cuộc trò chuyện với hai nhà “nghiên cứu tử vi” trẻ tuổi.
Dưới đây là câu chuyện với thạc sĩ Phùng Đức Tùng:
Xin hỏi năm Đinh Hợi sẽ là năm tốt hay năm xấu đối với việc sinh con?
Đây là một câu hỏi rất quen thuộc đối với chúng tôi. Năm 2007 theo tử vi là một năm rất tốt đối với con trai và là năm trung bình đối với con gái.
Liệu cha mẹ có chọn năm tốt để sinh con?
Kết quả nghiên cứu cho thấy cha mẹ có xu hướng rõ rệt là chọn năm tốt để sinh con. Những năm được cho là năm tốt, số trẻ em sinh ra cao hơn 7,0% so với số trẻ em sinh ra trung bình của các năm. Thông thường, cha mẹ chỉ chọn năm tốt để sinh con nếu như năm đó là năm tốt cho con trai.
Trẻ em sinh năm tốt có phát triển tốt hơn?
Thật ngạc nhiên là những đứa trẻ sinh năm tốt có trình độ giáo dục và chỉ số phát triển về sức khoẻ tốt hơn rõ rệt so với trẻ sinh vào các năm khác.
Kết quả nghiên cứu cho thấy những trẻ sinh năm tốt có số năm đi học cao hơn khoảng 10% so với số năm đi học trung bình của nhóm trẻ nghiên cứu và các chỉ số đo lường sức khoẻ (được đo lường bằng chỉ số BMI và Z_score) cũng cao hơn so với mức trung bình của nhóm trẻ nghiên cứu.
Một điều thú vị nữa là khi so sánh những đứa trẻ sinh ra bởi cùng một cặp vợ chồng thì những trẻ sinh năm tốt vẫn có sự phát triển về giáo dục và sức khoẻ tốt hơn anh hoặc em của chúng sinh ở những năm khác.
Vậy đằng sau hiện tượng này là gì?
Nguyên nhân chính của sự khác biệt về phát triển con người giữa trẻ sinh năm tốt và trẻ sinh vào các năm khác không phải là do yếu tố “tử vi” (năm tốt) mà là do những cặp vợ chồng có con sinh năm tốt tin rằng trẻ sinh năm tốt sẽ có khả năng bẩm sinh tốt hơn và do vậy họ đầu tư nhiều hơn (tác động của yếu tố nuôi dưỡng).
Họ chuẩn bị kế hoạch sinh con, tài chính, kiến thức chăm sóc con tốt hơn và chuẩn bị đầy đủ các yếu tố về tâm lí để sẵn sàng nuôi đứa trẻ trong những điều kiện tốt.
Mặt khác, trẻ sinh năm tốt có thể tin vào tử vi và được những người xung quanh khích lệ làm cho chúng tự tin hơn do đó có tác động tích cực đến tiếp thu giáo dục cũng như sức khoẻ của trẻ.
Khuyến cáo nào đối với các nhà làm chính sách?
Một số vấn đề chính sách liên quan đến hiện tượng chọn năm sinh cho con là: những năm được cho là năm tốt sẽ có sự bùng nổ về số trẻ em sinh ra dẫn đến sự quá tải về việc cung cấp các dịch vụ y tế, giáo dục và việc làm.
Trong khi đó, đối với các năm được cho là không tốt thì lại có hiện tượng ngược lại. Mặt khác, việc chọn năm sinh cho con có thể dẫn đến hiện tượng nạo phá thai ảnh hưởng đến sức khoẻ sinh sản và cân bằng về giới tính.
Theo Tiền Phong
Cứ sinh được con trong năm nay là đẹp rồi bạn ạ!
- 02:49 PM 29/05/2007 #78
Nhà chị cả họ thích con trai, bản thân chị thích con gái nhưng chồng chị lại thích con trai lắm. Vì vậy khi biết tin, anh ấy cũng hơi buồn, mặc dù vẫn động viên, nhưng chị cứ cảm thấy như mình có lỗi.:Thinking: Năm nay con trai thì tốt, còn con gái thì trung bình thôi, thương con gái quá!
Trời cho như vậy, cũng không thể khác được, phải vậy không em?
- 05:10 PM 29/05/2007 #79
-
Hy vọng mới trong điều trị hội chứng tự kỷ ở trẻ
Một nghiên cứu mới nhất về cấu trúc và sự phát triển não bộ của trẻ tự kỷ do nhà thần kinh học...
-
não thai nhi phat triển hoàn thiện vào tuần bao nhiêu ah!
chào các chị!có chị nào biết đến tuần thứ bao nhiêu thì não thai nhi phát triển hết ko?chỉ cho em với
-
Phương pháp "truyền miệng" của các mẹ các chị để đoán biết giới tính thai nhi từ khi bé mới vài tuần tuổi
Các mẹ bé ơi, nếu ai mới mang thai chưa đủ tuần tuổi để siêu âm giới tính của con, mà tò mò muốn biết con mình "giống ba" hay "giống mẹ" thì hãy thử phương pháp sau đây. Mình áp dụng rồi, cho kết quả chính xác :Applause: Các mẹ nó tháo chiếc nhẫn cưới đang đeo treo vào 1 sợi chỉ. Nhẫn của ba hay...
-
[clip] Xúc động quá sức mạnh của tình mẫu tử...
Câu chuyện xúc động quá các mẹ ạ: https://www.youtube.com/watch?v=f4fvDTOK0MA
-
Tư thế nằm chuẩn theo từng quý thai kỳ
Mắm- nhỏ bạn thân của mình bầu 6.5 tháng hỏi mình lúc ngủ...nằm kiểu gì...mình nói mình nằm nghiêng...
-
10 lý do nên dùng tã giấy Bambo Nature
Nếu như bạn ưa thích sự tiện lợi của tã giấy dùng một lần và muốn chọn cho bé một sản phẩm tốt...
- 05:52 PM 29/05/2007 #80
Mặc dù vẫn còn hy vọng nhưng mà cũng khó lắm chị a làm sao biết chính xác đc.Với em thì con nào cũng đc vì mình được làm thiên chức của người phụ nữ.Em biết chồng em và tất cả mọi người( cả nội lẫn ngoại) đều mong có cháu trai vì BC em là trưởng mà duy nhất, đến chồng em cũng có mỗi chồng em là trai thôi nên cũng khá áp lực.Em cũng đã phải làm công tác tư tưởng trc rồi,nếu có gái thì cũng vui vẻ.Nhà em có mấy đứa cháu gái thích lắm,dễ bảo mà lại còn ngoan,mong sao con em mà là con gái cũng đc như thế.Chị ơi đừng suy nghĩ nhiều ko bé cũng buồn đó chị a.Vui lên nào :Smiling:[/QUOTE]
Hhihi, sao nhà chồng bạn giống nhà chồng mình vậy , BC mình cũng là con một, đến chồng mình cũng là con một luôn nên mình cũng hơi hơi thích con trai hơn con gái 1 chút ( chỉ 1 chút thôi nha, con nào cũng là con mình mà ). Chồng mình thì con nào cũng được nên mình cũng chẳng có áp lực gì, miễn con cái khỏe mạnh xinh xắn là vui rồi. Bây giờ baby của mình mới được có hơn 9 tuần, chắc còn lâu mới biết được giới tính em bé nhưng mấy người bạn mình thì cứ nói mình có baby mà đẹp ra thì chắc là con trai rồi ( chả biết đúng không nữa). Có chị nào khi có baby mà xinh đẹp hơn rồi sinh con trai không, nói cho em biết nhé, hihihi ."Chúng ta hay nói quá nhìêu về bản thân. Đừng làm thế. Người khác sẽ làm điều đó khi............ chúng ta đi khỏi"
Đọc tiếp trên Webtretho
Bài tương tự
- Biết giới tính thai nhi khi 11 tuần 4 ngày
- dự đoán giới tính thai nhi không qua siêu âm
- Phương pháp "truyền miệng" của các mẹ các chị để đoán biết giới tính thai nhi từ khi bé mới vài tuần tuổi
- Thảo luận về vấn đề nghiêm cấm cho biết giới tính thai nhi
- não thai nhi phat triển hoàn thiện vào tuần bao nhiêu ah!

markdown:
- 10:04 AM 17/05/2007
[#61]
Hi!!!!!!!
Chào bạn!
Mình đã có một bé gái, 16 tuần siêu âm là có thể biết được trai hay gái rồi đó. Mình siêu âm của nhóm Bác sĩ BVPS Từ Dũ ở đường Nguyễn Trãi. Ở đây siêu âm rất đông, chính xác lắm và bác sĩ rất vui tính. Siêu âm 4D giá mắc hơn chút đỉnh nhưng được nhìn thấy em bé rõ lắm, dễ thương vô cùng... Bác sĩ sẽ chép ảnh em bé lưu trữ vào CD để bạn có thể giữ làm kỷ niệm cho bé. Siêu âm còn giúp bạn biết đưộc tương đối chính xác: chiều dài, cân nặng của em bé. Chúc bạn vui!!!!
-
- 10:47 AM 17/05/2007
[#62]
[QUOTE=momo;887268]Hôm 13 tuần, tớ siêu âm chỗ bác Cường, bé nhà tớ nó quay lưng thế này này, bác bảo khả năng lớn là con gái. Không hiểu sao bác nhìn ra được.
Bây giờ 15 tuần đã chính xác hơn chưa nhỉ?
15 tuần chắc là cũng biết rồi đấy mẹ nó ạ. Hôm mình sa 16tuaan nhìn rõ lắm rồi. Hôi 12 tuần sa bác sỹ Cường, tư thế em bé nhà mình cũng y như vậy đấy ,à bác sỹ phán có khả năng con trai. Hình như bác sỹ căn cứ vào kích thước xương đùi và lưỡng đỉnh để dự đoán thì phải. Muốn chắc ăn mẹ nó để 16 tuần hãy sa.
- 03:51 PM 17/05/2007
[#63]
[QUOTE=Me Comfort;888707]
. Thôi, theo lời khuyên mẹ Comfort thì nhà tớ sẽ chờ đến tuần sau vậy.
- 09:04 AM 19/05/2007
[#64]
Bạn cứ đi siêu âm đi, không sao đâu. Mình đây 11 tuần 5 ngày đi siêu âm 4D để biết giới tính vì chị mình bảo 12 tuần lần trước là chị ý biết được rồi. Nhưng lần đấy mình siêu âm trong Phòng khám dịch vụ của Viện C (56 H.B.Trưng), bsỹ bảo còn bé nên chưa biết (mình nghĩ là trong viện cấm nói vì mình nhìn thấy em bé cũng rõ thân hình rồi). Hôm vừa rồi mình lại đi siêu âm 4D tiếp, lúc đó là 15 tuần 4 ngày. Lúc đầu mình cũng hơi lo vì 2 lần sát nhau quá, nhg vì mình cũng muốn biết trước ngày sinh nhật mình nên mình quyết định đi (vì nhiều ng cũng bảo ko sao cả). Mình khám ở Phòng khám Hoa Hồng (số 2 Triệu Quốc Đạt), vừa "soi" cái bsỹ đã bảo giống bố rồi làm mình vui quá. Bsỹ bảo thường thì 12 tuần là biết được rồi (đối với đứa trẻ phát triển nhanh) ko thì 14,15 tuần trở đi là rõ, nếu là thai trai thì phát triển rõ và độ chính xác cao nhất. Chúc vợ chồng bạn được như mong muốn.
- 09:55 AM 19/05/2007
[#65]
Mình cảm ơn mẹ 023313328 nhiều nhé! sẵn đây cho mình hỏi là siêu âm ở bác sĩ BVPS Từ Dũ có siêu ngày chủ nhật không? và thời gian làm việc ở đó thế nào để mình sắp xếp mình đi. Vì mình ở tận dưới Đồng Nai lận. Hồi mới có thai được khoảng 2 tuần mình có bị cảm, ho (không sốt ) nhưng mình không dám uống thuốc, chỉ dám ăn tắc chấm muối và đồ chua để giải cảm thôi, mình không biết cảm ho như vậy có ảnh hưởng đến em bé không nhỉ? Lo lắng quá đi, hôm mình siêu âm lúc được 16 tuần thì bác sĩ nói rằng thai khỏe, tốt . Nhưng mình nghe các mẹ trong diễn đàn bảo là đến 22 tuần siêu âm hình thái học sẽ biết được dị tật thai nhi. Mình sẽ cố gắng lên SG để siêu âm 4D xem sao. Cảm ơn các mẹ thật nhiều nhe!
- 09:50 AM 20/05/2007
[#66]
Các mẹ à!
Em đang có bầu ở tuần 12. Hôm qua e vừa đi siêu âm ở chỗ Bác sỹ Cường xong. Em bé khỏe mạnh và bình thường. Lúc em hỏi giới tính, bác sỹ trả lời là 70%là con trai. Không bít có đúng ko các mẹ nhỉ. Hix với em thì con gái hay con trai đều được nhưng ông bà nội, ngoại và bố cháu mong con trai lắm. Nhiều lúc áp lực ghê, bác sỹ nói thế em cũng vui nhưng cũng lo khi thấy mọi người mừng vui quá. Lỡ rơi vào 30 % thì tội cho em bé lắm (bây giờ đã suốt ngày bị gọi là cu Nhím roài.)Mẹ Bi ơi, mẹ Bi của Nhím đâu ồi ồi....:LoveStruc:
- 10:32 AM 28/05/2007
[#67]
Bé của mình được 14w rồi, nôn biết giới tính của bé quá! Ở SG thì sa ở bác sỉ nào biết sớm & chính xác nhỉ!
- 10:48 AM 28/05/2007
[#68]
Tuần 20 m cg siêu âm của Bs Cường ở Đ.B.Phủ, bác bảo cháu trai but cg vẫn chưa yên tâm lắm nên chỉ bảo cả nhà là "ku" rùi but fải cần them time cho chắc chắn. Như thế m cũng thoải mái hơn thanhthaotim a. Chịu khó chờ thêm chút time rùi siêu âm tiếp nhé.
*M là bé đầu tiên, siêu âm trông thấy con thích lắm!!!*hihi:Battin ey:
**Chúc mẹ cháu như ý nhé**
- 11:08 AM 28/05/2007
[#69]
Chúc mẹ con vui khỏe.
- 11:17 AM 28/05/2007
[#70]
Vậy siêu âm 11 tuần BS nói là chắc con gái quá thì thế nào nhỉ?
- 09:28 AM 29/05/2007
[#71]
Có khi nào bs Cường đoán giới tính sai không nhỉ? Mình đang hi vọng bác ấy nói nhầm đây, nhưng chắc không thể được vì hôm trước SA 4D con mình được 16 tuần 5 ngày rồi, bs nói là "gái". Về nhà buồn quá, vì thấy ai cũng thích con trai, ai cũng SA là con trai, ox mình cũng thích con trai, và mình cũng thích con trai năm ĐInh Hợi, cho con đỡ khổ. Chẳng biết làm sao.
- 09:35 AM 29/05/2007
[#72]
- 09:36 AM 29/05/2007
[#73]
- 09:37 AM 29/05/2007
[#74]
- 11:21 AM 29/05/2007
[#75]
em mới có khoảng 6 tuần, xem lịch trên thì ra thằng Ku, không biết thế nào cả. Phải đợi sau này SA sau.
- 11:54 AM 29/05/2007
[#76]
- 01:16 PM 29/05/2007
[#77]
Baby của mình giống bố nó bạn ạ!
Để mình gửi cho bạn bài báo này nhé!
Sinh con, chọn tuổi
Mấy năm lại đây, đâu đâu cũng thấy kể chuyện sinh con, chọn năm, chọn tháng, chọn giờ rồi thậm chí chọn cả người đỡ đẻ.
Năm nay, một lần nữa thiên hạ kháo nhau sinh con năm Đinh Hợi vì cho rằng năm nay là năm "heo vàng".
Những người tuổi này, đặc biệt là con trai, thường thành đạt và may mắn. Theo quan niệm xưa "Trai Đinh, Nhâm, Quý thì tài", nhiều bậc cha mẹ luôn mong ước và cố gắng để sinh cho được một quý tử vào đúng năm Đinh Hợi.
Cũng giống như cuối năm 2005, có tin đồn cho rằng năm 2006 là năm "chó vàng" khiến cho nhiều người cả tin chọn năm đó làm năm tiến hành các việc đại sự, họ luận rằng: bản chất con chó là trung thành mà là "chó vàng" thì đúng là ào ào tiền bạc tới.
Thực chất của vấn đề là do người xưa dùng 10 Thiên can gồm Giáp, Ất, Bính, Đinh, Mậu, Kỷ, Canh, Tân, Nhâm, Quý; kết hợp với 12 Địa chi gồm 12 con giáp làm con vật biểu trưng (Tý (chuột), Sửu (trâu - bò), Dần (hổ), Mão (mèo), Thìn (rồng), Tỵ (rắn), Ngọ (ngựa), Mùi (dê), Thân (khỉ), Dậu (gà), Tuất (chó), Hợi (lợn), để tính năm, tháng, ngày, giờ sử dụng trong cuộc sống, cũng để sử dụng trong xem vận số cho mỗi con người. Tức là lấy 10 Thiên can phối hợp với 12 Địa chi để tạo thành, mở đầu là Giáp Tý kết thúc là Quý Hợi, sáu mươi năm lại quay lại một tuổi.
Người ta đang quá mong mỏi mọi việc tốt đẹp, phát tài, phát lộc nên đặt cho các năm thành Kim (vàng) hết. Ví dụ: 2006 thì thành chó vàng - Kim Cẩu. Năm 2007 thì lại biến thành Kim Trư - lợn vàng.
Thức ra, đây là cách chơi chữ đồng âm của người xưa để nói lên mong ước của mình. Chữ Kim (hiện tại - ngày nay) được thay thế bởi chữ Kim (vàng) nên khi nói "Kim niên Đinh Hợi" đúng ra phải hiểu là - năm nay là năm Đinh Hợi, nhưng một số người lại hiểu nhầm một cách cố ý thành "năm lợn vàng". Nếu vậy thì 12 con giáp của các năm sẽ đều là "vàng" (Kim) cả. Các nhà thống kê xã hội học cũng đã cho rằng danh nhân tuổi Đinh Hợi cũng chỉ tương đương với các danh nhân cầm tinh 11 con giáp còn lại.
Để sinh con vào năm này, nhiều đôi trai gái đã quyết định cưới nhau vội vã, cho dù tuổi còn ít, điều kiện kinh tế, công việc chưa ổn định. Nên khi cưới nhau về vợ chồng lại xung đột, tranh cãi do chưa hiểu hết về nhau, hoặc do kinh tế eo hẹp. Thậm chí nhiều đôi lại mâu thuẫn cho rằng năm nay chưa cưới nhau được, nhưng lại chấp nhận có con trước mà chưa hề cưới hỏi, hay có sự chuẩn bị nào để làm bố, làm mẹ cả.
Thậm chí nhiều người tính năm tính tháng cho tốt giờ, đúng con trai, nhiều sản phụ mang thai từ năm trước muốn sinh con năm Đinh Hợi đã áp dụng các biện pháp để "hãm" ngày sinh chờ qua giao thừa. Sướng đâu chưa thấy, làm như vậy rất nguy hiểm cho tính mạng, cũng như sức khoẻ con trẻ.
Để có con tuổi Đinh Hợi nhiều người đã làm những việc thất đức. Họ cho năm Đinh Hợi sinh con trai mới tốt, con gái không tốt nên nhiều người tìm mọi cách để sinh con trai. Khi siêu âm ra con gái thì vợ chồng lại xung khắc, đổ lỗi cho nhau, mâu thuẫn trong gia đình nảy sinh, mất hạnh phúc, thậm chí, nhiều người còn bỏ thai, đánh mất hạnh phúc gia đình, tước đi mầm sống của con.
Việc đua nhau sinh con vào năm Đinh Hợi sẽ khiến các bệnh viện, trạm xá quá tải gây khó khăn cho việc chăm sóc sản phụ. Các điều kiện dịch vụ thiết yếu đi kèm cũng khó đáp ứng đầy đủ, nên việc nuôi dưỡng, đặc biệt là tìm trường học cũng như xin việc làm cho cái con sau này rất khó khăn, nhất là ở các thành phố, ngoài ra, còn ảnh hưởng xấu tới các yếu tố khác như: môi trường, anh ninh trật tự, tệ nạn xã hội…
Một đứa trẻ có tương lai tốt, chỉ khi nó được sinh ra và lớn lên trong tình yêu thương, giáo dục của cha mẹ, được chăm sóc khoẻ mạnh ngay từ khi trong lòng mẹ.
(Theo UB Dân số, Gia đình & Trẻ em Hà Tĩnh)
Và trong bài báo này, người ta cũng nói rằng sinh năm tốt là năm đó em bé được chú trọng chăm sóc để phát triển tốt hơn thôi chứ người ta có quan trọng con trai con gái đâu!"Thực hư chuyện chọn năm để sinh con
Website chính thức của Ngân hàng Thế giới đã công bố một công trình nghiên cứu của hai chuyên gia người Việt về năm sinh và ảnh hưởng của nó đến sự phát triển con người.
Hai tác giả của công trình “nghiên cứu tử vi” này là Tiến sĩ Đỗ Quý Toàn - Nhóm nghiên cứu kinh tế phát triển - Ngân hàng Thế giới tại Washington (Mỹ), và Thạc sĩ Phùng Đức Tùng - Chuyên viên Vụ Xã hội Môi trường - Tổng cục Thống kê, điều trùng hợp đầu tiên về năm sinh là cả hai tác giả đều sinh năm 1974.
Nghiên cứu mang tựa đề “Mê tín, kế hoạch hoá gia đình và phát triển con người” (Superstition, Family Planning, and Human Development), hai tác giả đã đề cập hiện tượng bùng nổ trẻ em sinh ra vào những năm được coi là năm tốt (theo tử vi) không chỉ ở Việt Nam mà ở cả Trung Quốc, Đài Loan hay Hồng Kông.
Sau đó, các tác giả kiểm định xem liệu có đúng là ở Việt Nam cha mẹ thường chọn năm sinh cho con và liệu những đứa trẻ sinh năm tốt có phát triển tốt hơn những đứa trẻ sinh vào các năm khác về các yếu tố phát triển con người như y tế và giáo dục?
Nếu có sự khác biệt về phát triển con người giữa trẻ sinh năm tốt và trẻ sinh vào các năm khác thì yếu tố nào có thể lý giải được sự khác biệt này? Tại sao việc chọn năm tốt để sinh con vẫn tồn tại và các vấn đề về chính sách cần đặt ra đối với hiện tượng này là gì?
Giáo sư kinh tế Trần Hữu Dũng (Đại học Wright State Dayton, Mỹ) cho hay công trình nghiên cứu của hai tác giả trẻ tuổi này đã có được tiếng vang rất tốt khi công bố tại Mỹ, được nhiều tờ báo thuật lại như Boston Globe, Washington Post, Atlantic…
Khi năm mới Đinh Hợi sắp đến với mọi nhà, chúng tôi đã “tranh thủ” được cuộc trò chuyện với hai nhà “nghiên cứu tử vi” trẻ tuổi.
Dưới đây là câu chuyện với thạc sĩ Phùng Đức Tùng:
Xin hỏi năm Đinh Hợi sẽ là năm tốt hay năm xấu đối với việc sinh con?
Đây là một câu hỏi rất quen thuộc đối với chúng tôi. Năm 2007 theo tử vi là một năm rất tốt đối với con trai và là năm trung bình đối với con gái.
Liệu cha mẹ có chọn năm tốt để sinh con?
Kết quả nghiên cứu cho thấy cha mẹ có xu hướng rõ rệt là chọn năm tốt để sinh con. Những năm được cho là năm tốt, số trẻ em sinh ra cao hơn 7,0% so với số trẻ em sinh ra trung bình của các năm. Thông thường, cha mẹ chỉ chọn năm tốt để sinh con nếu như năm đó là năm tốt cho con trai.
Trẻ em sinh năm tốt có phát triển tốt hơn?
Thật ngạc nhiên là những đứa trẻ sinh năm tốt có trình độ giáo dục và chỉ số phát triển về sức khoẻ tốt hơn rõ rệt so với trẻ sinh vào các năm khác.
Kết quả nghiên cứu cho thấy những trẻ sinh năm tốt có số năm đi học cao hơn khoảng 10% so với số năm đi học trung bình của nhóm trẻ nghiên cứu và các chỉ số đo lường sức khoẻ (được đo lường bằng chỉ số BMI và Z_score) cũng cao hơn so với mức trung bình của nhóm trẻ nghiên cứu.
Một điều thú vị nữa là khi so sánh những đứa trẻ sinh ra bởi cùng một cặp vợ chồng thì những trẻ sinh năm tốt vẫn có sự phát triển về giáo dục và sức khoẻ tốt hơn anh hoặc em của chúng sinh ở những năm khác.
Vậy đằng sau hiện tượng này là gì?
Nguyên nhân chính của sự khác biệt về phát triển con người giữa trẻ sinh năm tốt và trẻ sinh vào các năm khác không phải là do yếu tố “tử vi” (năm tốt) mà là do những cặp vợ chồng có con sinh năm tốt tin rằng trẻ sinh năm tốt sẽ có khả năng bẩm sinh tốt hơn và do vậy họ đầu tư nhiều hơn (tác động của yếu tố nuôi dưỡng).
Họ chuẩn bị kế hoạch sinh con, tài chính, kiến thức chăm sóc con tốt hơn và chuẩn bị đầy đủ các yếu tố về tâm lí để sẵn sàng nuôi đứa trẻ trong những điều kiện tốt.
Mặt khác, trẻ sinh năm tốt có thể tin vào tử vi và được những người xung quanh khích lệ làm cho chúng tự tin hơn do đó có tác động tích cực đến tiếp thu giáo dục cũng như sức khoẻ của trẻ.
Khuyến cáo nào đối với các nhà làm chính sách?
Một số vấn đề chính sách liên quan đến hiện tượng chọn năm sinh cho con là: những năm được cho là năm tốt sẽ có sự bùng nổ về số trẻ em sinh ra dẫn đến sự quá tải về việc cung cấp các dịch vụ y tế, giáo dục và việc làm.
Trong khi đó, đối với các năm được cho là không tốt thì lại có hiện tượng ngược lại. Mặt khác, việc chọn năm sinh cho con có thể dẫn đến hiện tượng nạo phá thai ảnh hưởng đến sức khoẻ sinh sản và cân bằng về giới tính.
Theo Tiền Phong
Cứ sinh được con trong năm nay là đẹp rồi bạn ạ!
- 02:49 PM 29/05/2007
[#78]
Nhà chị cả họ thích con trai, bản thân chị thích con gái nhưng chồng chị lại thích con trai lắm. Vì vậy khi biết tin, anh ấy cũng hơi buồn, mặc dù vẫn động viên, nhưng chị cứ cảm thấy như mình có lỗi.:Thinking: Năm nay con trai thì tốt, còn con gái thì trung bình thôi, thương con gái quá!
Trời cho như vậy, cũng không thể khác được, phải vậy không em?
- 05:10 PM 29/05/2007
[#79]
-
[Hy vọng mới trong điều trị hội chứng tự kỷ ở trẻ](http://www.webtretho.com/forum/f3156/hy-vong-moi-trong-dieu-tri-hoi-chung-tu-ky-o-tre-1966451/)
Một nghiên cứu mới nhất về cấu trúc và sự phát triển não bộ của trẻ tự kỷ do nhà thần kinh học...
-
[não thai nhi phat triển hoàn thiện vào tuần bao nhiêu ah!](http://www.webtretho.com/forum/f96/nao-thai-nhi-phat-trien-hoan-thien-vao-tuan-bao-nhieu-ah-93733/)
chào các chị!có chị nào biết đến tuần thứ bao nhiêu thì não thai nhi phát triển hết ko?chỉ cho em với
-
[Phương pháp "truyền miệng" của các mẹ các chị để đoán biết giới tính thai nhi từ khi bé mới vài tuần tuổi](http://www.webtretho.com/forum/f92/phuong-phap-truyen-mieng-cua-cac-me-cac-chi-de-doan-biet-gioi-tinh-thai-nhi-tu-khi-be-moi-vai-tuan-tuoi-867484/)
Các mẹ bé ơi, nếu ai mới mang thai chưa đủ tuần tuổi để siêu âm giới tính của con, mà tò mò muốn biết con mình "giống ba" hay "giống mẹ" thì hãy thử phương pháp sau đây. Mình áp dụng rồi, cho kết quả chính xác :Applause: Các mẹ nó tháo chiếc nhẫn cưới đang đeo treo vào 1 sợi chỉ. Nhẫn của ba hay...
-
[[clip] Xúc động quá sức mạnh của tình mẫu tử...](http://www.webtretho.com/forum/f92/clip-xuc-dong-qua-suc-manh-cua-tinh-mau-tu-1920145/)
Câu chuyện xúc động quá các mẹ ạ: https://www.youtube.com/watch?v=f4fvDTOK0MA
-
[Tư thế nằm chuẩn theo từng quý thai kỳ](http://www.webtretho.com/forum/f92/tu-the-nam-chuan-theo-tung-quy-thai-ky-1939198/)
Mắm- nhỏ bạn thân của mình bầu 6.5 tháng hỏi mình lúc ngủ...nằm kiểu gì...mình nói mình nằm nghiêng...
-
[10 lý do nên dùng tã giấy Bambo Nature](http://www.webtretho.com/forum/f3156/10-ly-do-nen-dung-ta-giay-bambo-nature-1966071/)
Nếu như bạn ưa thích sự tiện lợi của tã giấy dùng một lần và muốn chọn cho bé một sản phẩm tốt...
- 05:52 PM 29/05/2007
[#80]
Mặc dù vẫn còn hy vọng nhưng mà cũng khó lắm chị a làm sao biết chính xác đc.Với em thì con nào cũng đc vì mình được làm thiên chức của người phụ nữ.Em biết chồng em và tất cả mọi người( cả nội lẫn ngoại) đều mong có cháu trai vì BC em là trưởng mà duy nhất, đến chồng em cũng có mỗi chồng em là trai thôi nên cũng khá áp lực.Em cũng đã phải làm công tác tư tưởng trc rồi,nếu có gái thì cũng vui vẻ.Nhà em có mấy đứa cháu gái thích lắm,dễ bảo mà lại còn ngoan,mong sao con em mà là con gái cũng đc như thế.Chị ơi đừng suy nghĩ nhiều ko bé cũng buồn đó chị a.Vui lên nào :Smiling:[/QUOTE]
Hhihi, sao nhà chồng bạn giống nhà chồng mình vậy
, BC mình cũng là con một, đến chồng mình cũng là con một luôn nên mình cũng hơi hơi thích con trai hơn con gái 1 chút ( chỉ 1 chút thôi nha, con nào cũng là con mình mà ). Chồng mình thì con nào cũng được nên mình cũng chẳng có áp lực gì, miễn con cái khỏe mạnh xinh xắn là vui rồi. Bây giờ baby của mình mới được có hơn 9 tuần, chắc còn lâu mới biết được giới tính em bé nhưng mấy người bạn mình thì cứ nói mình có baby mà đẹp ra thì chắc là con trai rồi ( chả biết đúng không nữa). Có chị nào khi có baby mà xinh đẹp hơn rồi sinh con trai không, nói cho em biết nhé, hihihi .
**"** *Chúng ta hay nói quá nhìêu về bản thân. Đừng làm thế. Người khác sẽ làm điều đó khi............ chúng ta đi khỏi*"
## Đọc tiếp trên Webtretho
## Bài tương tự
-
[Biết giới tính thai nhi khi 11 tuần 4 ngày](http://www.webtretho.com/forum/f92/biet-gioi-tinh-thai-nhi-khi-11-tuan-4-ngay-1094412/)
-
[dự đoán giới tính thai nhi không qua siêu âm](http://www.webtretho.com/forum/f92/du-doan-gioi-tinh-thai-nhi-khong-qua-sieu-am-662034/)
-
[Phương pháp "truyền miệng" của các mẹ các chị để đoán biết giới tính thai nhi từ khi bé mới vài tuần tuổi](http://www.webtretho.com/forum/f92/phuong-phap-truyen-mieng-cua-cac-me-cac-chi-de-doan-biet-gioi-tinh-thai-nhi-tu-khi-be-moi-vai-tuan-tuoi-867484/)
-
[Thảo luận về vấn đề nghiêm cấm cho biết giới tính thai nhi](http://www.webtretho.com/forum/f92/thao-luan-ve-van-de-nghiem-cam-cho-biet-gioi-tinh-thai-nhi-319041/)
-
[não thai nhi phat triển hoàn thiện vào tuần bao nhiêu ah!](http://www.webtretho.com/forum/f96/nao-thai-nhi-phat-trien-hoan-thien-vao-tuan-bao-nhieu-ah-93733/)

WARC-Type: response

Content-Type: application/http; msgtype=response

WARC-Truncated: length

Server: PEN

Content-Type: text/html; charset=utf-8

Connection: close

Vary: Accept-Encoding

Set-Cookie: vbseo_loggedin=deleted; expires=Thu, 01-Jan-1970 00:00:01 GMT; path=/

Cache-Control: WTT cached

Pragma: private

Content-Encoding: gzip


text:
Thể loại phim
Xem Phim TV - Trang xem phim online hay, xem phim
miễn phí chất lượng tốt, Xem phim TV luôn cập nhật các bộ phim hành
động, phim chiếu rạp mới nhất với các thể loại phim tâm lý , phim hài ..v. Xem phim tại Xem phim
Tv sẽ luôn có phụ đề việt hoặc phim lồng tiếng đem đến sự thoải mái cho
các bạn khi xem phim. Xem phim tv sẽ hạn chế tối đa quảng cáo để luôn
là 1 sự lựa chọn phim online tốt nhất cho các bạn

Content-Type: text/html; charset=UTF-8

Cache-Control: max-age=0, no-cache, no-store, must-revalidate, post-check=0, pre-check=0

Pragma: no-cache

Server: cloudflare-nginx


markdown:
Thể loại phim
Xem Phim TV - Trang xem phim online hay, xem phim
miễn phí chất lượng tốt, Xem phim TV luôn cập nhật các bộ phim hành
động, phim chiếu rạp mới nhất với các thể loại phim tâm lý , phim hài ..v. Xem phim tại Xem phim
Tv sẽ luôn có phụ đề việt hoặc phim lồng tiếng đem đến sự thoải mái cho
các bạn khi xem phim. Xem phim tv sẽ hạn chế tối đa quảng cáo để luôn
là 1 sự lựa chọn phim online tốt nhất cho các bạn


text:
Bức ảnh "nụ hôn cuối cùng" gây xúc động lòng người
Một vụ tai nạn thương tâm đã xảy ra vào lúc 9h sáng ngày 25/6 ở khu chợ của thành phố Tuyền Châu, tỉnh Phúc Kiến, Trung Quốc. Nạn nhân là một cô gái tên Xiao Jing, 22 tuổi, quê ở thành phố Tam Minh, tỉnh Phúc Kiến. Cô gái đã vô tình trượt chân ngã từ tầng 5 xuống và thiệt mạng.
Nghe được tin dữ, bạn trai của cô gái là Xiao Li vội vã lao tới nơi. Nhìn thấy Xiao Jing nằm giữa vũng máu, Xiao Li chạy đến quỳ xuống bên cạnh cô. Bàn tay run rẩy, chàng trai kéo tấm khăn đang phủ lên mặt người yêu. Và lúc này, toàn thân anh bắt đầu run lên bần bật, nước mắt tuôn trào.
Ôm chặt xác bạn gái đã lạnh ngắt trong vòng tay, chàng trai đau đớn gọi tên cô gái liên tục không ngừng. 1 tiếng rưỡi sau, dưới sự thuyết phục của cảnh sát, anh nhẹ nhàng lau sạch máu trên mặt cô gái, chỉnh lại quần áo, tóc tai và trao cho người yêu một nụ hôn say đắm cuối cùng.
Những người chứng kiến đều không thể kìm được nước mắt khi thấy
chàng trai si tình bên xác người yêu.
Được biết, Xiao Jing từng làm việc tại một cửa hàng trong thành phố. Trước khi xảy ra vụ tai nạn vài ngày, Xiao Jing đã xin nghỉ việc.
Vào tháng 3 năm nay, cô gái thuê căn hộ trên tầng 5 này sống cùng Xiao Li. Vụ tai nạn xảy ra ngay sau khi Xiao Li vừa rời nhà đi làm.
Cảnh sát kiểm tra thấy trên thi thể Xiao Jing không có vết thương bất thường nào do giằng kéo ngoài những chấn thương khi va mạnh xuống đất. Bên cạnh đó, cầu thang bằng kim loại khá trơn, trên tay vịn vẫn còn dấu vết cho thấy Xiao Jing cố níu lại khi bị ngã. Dựa trên những yếu tố này, cảnh sát kết luận sơ bộ Xiao Jing vô tình bị trượt chân ngã xuống đất từ tầng 5.
Cầu thang nơi cô gái không may trượt chân ngã xuống.
Bố của Xiao Li cho biết, con trai mình và Xiao Jing đều lớn lên ở thành phố Tam Minh. Cả hai đã ở bên nhau từ khi còn là học sinh trung học. Sau khi tốt nghiệp trung học, Xiao Li vào một trường đại học ở Zhaozhou, trong khi Xiao Jing học đại học ở thành phố Tuyền Châu. Dù xa cách, cả hai vẫn thường xuyên liên lạc và đến thăm nhà nhau. Tốt nghiệp xong, Xiao Li đến Tuyền Châu và thuê nhà sống chung với Xiao Jing.
Cha của Xiao Li cho hay gia đình hai bên có mối quan hệ rất tốt và đang tính chuyện tổ chức lễ đính hôn, chỉ còn trì hoãn vì Xiao Jing muốn tìm một công việc ổn định trước.

markdown:
[](http://xahoi.com.vn/an-ninh-hinh-su/toa-tuyen-an/) **Tòa tuyên án**
Một vụ tai nạn thương tâm đã xảy ra vào lúc 9h sáng ngày 25/6 ở khu chợ của thành phố Tuyền Châu, tỉnh Phúc Kiến, Trung Quốc. Nạn nhân là một cô gái tên Xiao Jing, 22 tuổi, quê ở thành phố Tam Minh, tỉnh Phúc Kiến. Cô gái đã vô tình trượt chân ngã từ tầng 5 xuống và thiệt mạng.
Nghe được tin dữ, bạn trai của cô gái là Xiao Li vội vã lao tới nơi. Nhìn thấy Xiao Jing nằm giữa vũng máu, Xiao Li chạy đến quỳ xuống bên cạnh cô. Bàn tay run rẩy, chàng trai kéo tấm khăn đang phủ lên mặt người yêu. Và lúc này, toàn thân anh bắt đầu run lên bần bật, nước mắt tuôn trào.
Ôm chặt xác bạn gái đã lạnh ngắt trong vòng tay, chàng trai đau đớn gọi tên cô gái liên tục không ngừng. 1 tiếng rưỡi sau, dưới sự thuyết phục của cảnh sát, anh nhẹ nhàng lau sạch máu trên mặt cô gái, chỉnh lại quần áo, tóc tai và trao cho người yêu một nụ hôn say đắm cuối cùng.
*Những người chứng kiến đều không thể kìm được nước mắt khi thấy
chàng trai si tình bên xác người yêu*.
Được biết, Xiao Jing từng làm việc tại một cửa hàng trong thành phố. Trước khi xảy ra vụ tai nạn vài ngày, Xiao Jing đã xin nghỉ việc.
Vào tháng 3 năm nay, cô gái thuê căn hộ trên tầng 5 này sống cùng Xiao Li. Vụ tai nạn xảy ra ngay sau khi Xiao Li vừa rời nhà đi làm.
Cảnh sát kiểm tra thấy trên thi thể Xiao Jing không có vết thương bất thường nào do giằng kéo ngoài những chấn thương khi va mạnh xuống đất. Bên cạnh đó, cầu thang bằng kim loại khá trơn, trên tay vịn vẫn còn dấu vết cho thấy Xiao Jing cố níu lại khi bị ngã. Dựa trên những yếu tố này, cảnh sát kết luận sơ bộ Xiao Jing vô tình bị trượt chân ngã xuống đất từ tầng 5.
*Cầu thang nơi cô gái không may trượt chân ngã xuống.*
Bố của Xiao Li cho biết, con trai mình và Xiao Jing đều lớn lên ở thành phố Tam Minh. Cả hai đã ở bên nhau từ khi còn là học sinh trung học. Sau khi tốt nghiệp trung học, Xiao Li vào một trường đại học ở Zhaozhou, trong khi Xiao Jing học đại học ở thành phố Tuyền Châu. Dù xa cách, cả hai vẫn thường xuyên liên lạc và đến thăm nhà nhau. Tốt nghiệp xong, Xiao Li đến Tuyền Châu và thuê nhà sống chung với Xiao Jing.
Cha của Xiao Li cho hay gia đình hai bên có mối quan hệ rất tốt và đang tính chuyện tổ chức lễ đính hôn, chỉ còn trì hoãn vì Xiao Jing muốn tìm một công việc ổn định trước.
Clip đang được xem nhiều nhất:
[Dortmund trút giận bằng cơn mưa bàn thắng trước Galatasaray ](bong-da/champions-league/dortmund-trut-gian-bang-con-mua-ban-thang-truoc-galatasaray-187379.html)
Công ty cổ phần Truyền thông Sự kiện Việt Nam
**Trụ sở:** Số 2, Duy Tân, Quận Cầu Giấy, Hà Nội.
Chịu trách nhiệm nội dung: Nguyễn Trung Dũng
**© 2011 Xahoi.com.vn**
Giấy phép số 477/GP-TTĐT do Sở Thông Tin và Truyền Thông Hà Nội cấp ngày 10/06/2011.
**© Xahoi.com.vn** giữ bản quyền nội dung trên website này.

Server: nginx

Content-Type: text/html


text: Xemphim5s.com - Xem phim online, Phim HD, Full HD miễn phí, chất lượng hình ảnh rõ nét, tốc độ tải phim nhanh, không phải chờ đợi lâu. Xemphim5s.com luôn cập nhật phim mới để để mang đến cho các bạn những bộ phim hành động, võ thuật, phim bộ, các thể loại phim tâm lý, tình cảm, phim cấp 3, phim 18+ cực lôi cuốn và hấp dẫn nhất. Đặc biệt website rất thân thiện với người dùng và hạn chế tối đa các quảng cáo gây khó chịu khi xem phim. Chúc các bạn xem phim vui vẻ.

markdown: **Xemphim5s.com** - [, Xem phim online](http://xemphim5s.com) [,](http://xemphim5s.com) **Phim HD** [miễn phí, chất lượng hình ảnh rõ nét, tốc độ tải phim nhanh, không phải chờ đợi lâu.](http://xemphim5s.com) **Full HD** [luôn cập nhật](http://xemphim5s.com) **Xemphim5s.com** [để để mang đến cho các bạn những bộ](http://xemphim5s.com/phim-moi/) **phim mới** [,](http://xemphim5s.com/phim-hanh-dong/) **phim hành động** [võ thuật,](http://xemphim5s.com/phim-vo-thuat) [, các thể loại](http://xemphim5s.com/phim-bo/) **phim bộ** [,](http://xemphim5s.com/phim-tam-ly-xa-hoi) *phim tâm lý* [,](http://xemphim5s.com/phim-tinh-cam) *tình cảm* [cực lôi cuốn và hấp dẫn nhất. Đặc biệt website rất thân thiện với người dùng và hạn chế tối đa các quảng cáo gây khó chịu khi](http://xemphim5s.com/phim-18) *phim cấp 3, phim 18+* [. Chúc các bạn xem phim vui vẻ.](http://xemphim5s.com/) **xem phim**

Server: VietNix Admin

Vietnix-Cache: HIT from Backend