जनवरी 8, 1536 को ऐरागॉन की कैथरीन की मौत की खबर राजा और ऐनी तक पहुंच गई। उसकी मौत की खबर सुनकर वे बहुत खुश थे। अगले दिन, हेनरी ने सिर से लेकर पैर तक पीला पहनकर कैथरीन की मौत का उत्सव मनाया. इंग्लैंड में पीला रंग की खुशी और उत्सव का प्रतीक है। स्पेन में, ऐरागॉन की कैथरीन के देश में, काले के अलावा पीला रंग शोक का रंग है। इस कारण से, हेनरी और ऐनी द्वारा पीला पहनना शोक का प्रतीक हो सकता है। माँ के मरने पर ऐनी ने अपनी ओर से राजकुमारी मैरी के साथ समझौता करने का 
प्रयास किया।

फिर से गर्भवती रानी बेटे को जन्म न दे पाने के खतरों से परिचित थी। कैथरीन की मौत के साथ, हेनरी गैरकानूनी के किसी भी कलंक के बिना शादी के लिए आज़ाद होगा. मैरी ने ऐनी की पहल को ठुकरा दिया, शायद इन अफवाहों की वजह से कि ऐनी और/ या हेनरी ने कैथरीन को जहर दिया था। 

ये फैली जब उसके शव के संलेपन के समय पाया गया कि उसका दिल काला पड़ गया था। आधुनिक चिकित्सा विशेषज्ञ सहमत हैं कि यह विषाक्तता का परिणाम नहीं था लेकिन दिल के कैंसर के कारण था जो उस समय के लोगों की समझ में नहीं आया।

बाद में उस महीने, एक टूर्नामेंट में राजा घोड़े पर से गिर पड़ा और दो घंटे बेहोश रहा, ऐनी का मानना है कि इसकी चिंता के कारण पांच दिन बाद उसका गर्भपात हो गया।

पीटरबरो एब्बे में ऐरागॉन की कैथरीन के दफ़न के दिन, ऐनी का गर्भपात हुआ जो शाही राजदूत चैपायसके अनुसार लगभग साढ़े तीन महीने का था और जो "पुरुष" बच्चा लग रहा था।

चैपायस के लिए, यह व्यक्तिगत क्षति शाही शादी के अंत की शुरुआत थी।

बेटे के लिए हेनरी की बेताब इच्छा को देखते हुए ऐनी के गर्भधारण के अनुक्रम में रुचि पैदा होने लगी. लेखक माइक एश्ले का अनुमान है एलिज़ाबेथ के जन्म के बाद और 1536 में गिरे पुरुष बच्चे के जन्म से पहले ऐनी ने दो मृत बच्चों को जन्म दिया.

अधिकतर सूत्र केवल सितंबर 1533 में एलिज़ाबेथ के जन्म की, 1534 की गर्मियों में संभव गर्भपात की और लगभग चार माह के हमल के नर बच्चे के 1536 जनवरी में गर्भपात को सत्यापित करते हैं।

गर्भपात से ऐनी के संभलने के बाद हेनरी ने घोषणा की कि उसे "तंत्र-मंत्र (sortilege)" - एक फ़्रेंच शब्द जिसका मतलब "धोखा" या "वशीकरण" है, द्वारा शादी के लिए राजी किया गया था।

उसकी नई रखैल, जेन सेमुर जल्दी ही शाही क्वार्टरों में रहने आ गई। इसके बाद ऐनी के भाई को प्रतिष्ठित दरबारी सम्मान, ऑर्डर ऑफ़ गार्टर से मना कर दिया गया और उसकी बजाय सर निकोलस कैरू को दे दिया गया।

ऐनी से प्रभावित प्रचारकों में से एक द्वारा एक धर्मोपदेश का अपेक्षाकृत नया सबूत है कि क्रॉम्वेल और हेनरी की मठों के विघटन में क्रूर रणनीति का ऐनी का विरोध शायद उसकी सत्ता का अंत करने के लिए उनका संयुक्त प्रयास हो.

डेविड स्टार्की और बाद में अपनी निर्णायक जीवनी के नए संस्करण में रिक आइव्स दोनों ने बताया कि किस तरह सार्वजनिक उपदेश राजनीतिक राय के प्रचार और घोषणाओं का महत्वपूर्ण माद्यम हुआ करते थे।

उसके पतन से कुछ पहले ही, वे सुझाव देते हैं, ऐनी ने एक धर्मोपदेश पढ़वाया जिसके अनुसार एस्थर की बाइबिल की कहानी में क्रॉम्वेल दुष्ट परामर्शदाता था (ऐनी को एस्थर इंगित किया गया).

यह संभव है कि शाही लाभ के लिए मठों को भंग करने की योजना के खिलाफ़ ऐनी की अवज्ञा ने (हेनरी के साथ या बिना) क्रॉम्वेल को उसकी सत्ता का तख्ता पलटने के लिए मजबूर किया।

हेनरी अष्टम के दरबार में (1522-1533)
प्रारंभिक वर्ष (जन्म-1522)
पतन और वध (1536)
राजा के साथ संघर्ष