1930 में शेफिल्ड स्थित रॉयल इनफर्मरी के एक रोगविज्ञानी सेसिल जॉर्ज पाइन ने दाढ़ी की सड़न - साइकोसिस बारबे का इलाज़ करने के लिए पेनिसिलिन के प्रयोग की कोशिश की, लेकिन वे असफल रहे क्योंकि संभवतः वह दवा त्वचा में पर्याप्त रूप से गहरे नहीं घुस पायी. औप्थेल्मिया नियोनेटोरम: नवजातों में होने वाला एक गोनोकोकल संक्रमण, की दिशा में 25 नवम्बर 1930 को पेनिसिलिन के साथ पहली बार रोग के निदान का श्रेय उन्होंने अपने नाम दर्ज किया। उसके बाद उन्होंने चक्षु-संक्रमण के चार अतिरिक्त रोगियों (एक वयस्क एवं तीन शिशु) को ठीक किया, पर पांचवे रोगी को ठीक करने में चूक गए।

1939 में सर विलियम दुन स्कूल ऑफ पैथोलोजी, यूनिवर्सिटी ऑफ ऑक्सफोर्ड के ऑस्ट्रेलियाई वैज्ञानिक हॉवर्ड फ्लोरे (बाद में बैरोन फ्लोरे) एवं शोधकर्ताओं की एक टीम (अर्न्स्ट बोरिस चेन, ए.डी.गार्डनर, नॉर्मन हीटले, एम.जेनिंग्स, जे.ऑर-एविंग एवं जी-सैंडर्स) ने पेनिसिलिन के जीवाणुनाशक प्रभाव "इन वाइवो" को दर्शाने में महत्वपूर्ण प्रगति की। मानवों को ठीक करने की उनकी कोशिश नाकाम रही क्योंकि पेनिसिलिन की मात्रा पर्याप्त नहीं थी (इलाज किया जाने वाला पहला रोगी सुरक्षा बल का हवलदार एल्बर्ट एलेक्जेंडर था), लेकिन उन्होंने चूहे पर इसे कारगर और हानिरहित साबित किया।

पेनिसिलिन के कुछ अग्रणी परीक्षण इंग्लैंड के ऑक्सफोर्ड के रैडक्लिफ इनफर्मरी में किये गए। कुछ सूत्रों द्वारा इन परीक्षणों का उल्लेख पेनिसिलिन के पहले निदान के रूप में किया जाता है, हालांकि दर्द का परीक्षण पहले भी किया जा चुका था। 14 मार्च 1942 को जॉन बमस्टेड एवं और्वन हेस ने एक मरते हुए रोगी का जीवन पेनिसिलिन का प्रयोग करते हुए बचा लिया।

क्रिया-प्रणाली
उत्पादन
संरचना
चिकित्सीय अनुप्रयोग