Il descendit aux Enfers où il devint le Seigneur des Morts.
Cependant, Seth, le frère d'Osiris, devint jaloux du pouvoir et du succès de son frère et l'assassina, d'abord en le scellant dans un cercueil et en l'envoyant dans le Nil, puis en découpant son corps en morceaux et en les dispersant à travers l'Égypte. Isis récupéra les morceaux d'Osiris, le réassembla et, avec l'aide de sa sœur Nephtys, le ramena à la vie. Osiris était cependant incomplet - il lui manquait son pénis qui avait été mangé par un poisson - et ne pouvait donc plus régner sur terre. Il descendit aux Enfers où il devint le Seigneur des Morts. Mais avant son départ, Isis s'était accouplée avec lui sous la forme d'un cerf-volant et lui avait donné un fils, Horus, qui vengerait son père, reconquerrait le royaume et rétablirait l'ordre et l'équilibre sur terre.