human CMV가 생성하는 분자량 72,000 dalton의 immediate early protein(p72)과반응하는 단세포군 항체를 국내에서 분리된 CMV 야생주로 직접 제작하여 진단에 사용해보기 위한 것이다. 정상 인체 섬유아세포(Foreskin 유래)를 10% 우태아혈청이 함유된 Eagle'sminimal essential medium(MEM)에서 배양하여 사용하였으며 마우스 골수종서1포는 P3X63Ag8.653(ATCC, Maryland USA)을 5×10<sup>5</sup>/m1 세포수를 유지하도록 배양하였다. 사용된 항원은 선천성 CMV 감염아의 소변으로부터 검출한 CMV(KJHJ90)를 대량 증식시켜 사용하였다. 생후 6~8주된 Balb/c마우스의 복강내에 CMV 항원을 1주일 간격으로 4회 주사한 후 면역시킨 마우스 비장에서 얻은 임파구와 형질세포 종세포로 최적발육기의P3X63-Ag8.653을 사용하여 융합하였다. 융합세포를 배양한 후 간접면역형광항체법을 이용하여 항체가가 높은 것을 골랐다. 생산된 28종의 단세포군항체 중 그림1과 같이 LPC12와 LPC23클론이 AD169에 감염된 세포의 핵에 특히 강하게 반응하였다. 정제된 AD169를 SDS-PAGE한 후 Westernblotting을 하여 생산된 단세포군항체가 반응하는 항원의 분자량을 확인하였으며 그 중LPC12와 LPC23클론에서 생성된 단세포군항체는 약 72KDA의 항원과 특이적으로 가장 강하게 반응하였다. 본 연구에서 제작된 LPC12와 LPC23 클론에서 생성된 단세포군 항체를 이용하여선천성 CMV감염으로 확인된 소아의 소변을 이용하여 CMV AD 169주 유래 항체(P63-27)과 비교한 DEAFF 검사상 동일한 결과를 확인한 바 LPC12와 LPC23 클론 항체는 AD169(P63-27)과 같이 CMV 감염의 조기진단에 사용할 수 있을 것으로 사료된다.
이 연구에서 제작된 LPC12와 LPC23 클론에서 생성된 단세포군 항체를 이용하여선천성 CMV감염으로 확인된 소아의 소변을 이용해 CMV AD 169주 유래 항체과 비교한 DEAFF 검사상 동일한 결과를 확인한 바 LPC12와 LPC23 클론 항체는 AD169과 같이 CMV 감염의 조기진단에 사용할 수 있을 것으로 사료된다.